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            【中文期刊】 刘姗姗  岳素文  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2014年43卷1期 53-58页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR无模板测试技术,阐明引物二聚体形成的机制,解决PCR反应中引物二聚体形成的问题,推动SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术的应用.方法采用 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术...

            【关键词】 实时荧光定量PCRSYBR GreenⅠ二聚体

            浏览:632 被引:11 下载:34
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            【中文期刊】 张驰宇  张高红  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2004年20卷3期 387-392页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为建立一种新的SYBR greenⅠ实时定量RT-PCR方法,使之能够有效消除引物二聚体(PDs)对实时定量结果的影响.对RT-PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析.依据PDs和扩增产物的熔解温度(Tm)特点,在...

            【关键词】 二聚体,荧光实时定量RT-PCR,SYBR greenI,四步法,RNA定量

            浏览:517 被引:122 下载:77
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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《临床检验杂志》 2017年35卷5期 370-372页ISTICCA

            【摘要】 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)因灵敏度高、操作简便在各个领域得到了广泛的应用.然而,伴随其高灵敏度存在的非特异性问题在一定程度上限制了其应用.不同于普通检测方法,该技术的非特异性问题主要由可以指数...

            【关键词】 实时荧光定量PCR非特异性二聚体

            浏览:172 被引:10 下载:44
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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《临床检验杂志》 2016年34卷4期 244-246页ISTICCA

            【摘要】 目的 在内标双重PCR系统中寻找影响靶模板检测灵敏度的主要因素,并比较不同检测体系的灵敏度.方法 针对HBV基因设计普通引物对和中部同序引物对,比较引物二聚体(PD)含量;控制内标基因的Ct值约为30,调整内标引物浓度为10、8、5、2、1...

            【关键词】 双重PCR二聚体内标系统

            浏览:127 被引:2 下载:34
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            【中文期刊】 陈琪  刘晓峰  《江西医药》 2018年53卷8期 897-898,900页CA

            【摘要】 目的 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)过程中生成的引物二聚体(Primer Dimer,PD)回收再利用.方法 重组质粒pET28a(+)-ProDer f 1转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,...

            【关键词】 PCR特异性二聚体

            浏览:55 被引:0 下载:4
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            【中文期刊】 闻新棉  陈英剑  等 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2005年26卷7期 444-446页ISTICCA

            【摘要】 实时定量检测中引物二聚体的存在会严重影响检测结果的准确性,本文提出多方面的优化策略,以减少或消除实时定量检测中引物二聚体的集聚.

            【关键词】 实时定量SYBR Green Ⅰ二聚体

            浏览:248 被引:21 下载:8
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            【中文期刊】 徐祥  刘昕  等 《临床检验杂志》 2001年19卷3期 135-136页ISTICCA

            【摘要】 目的根据引物二聚体形成原理,建立一种新的克隆目的基因的方法。方法人工合成两条或两条以上3′端互补配对的寡核苷酸链,寡核苷酸链、Taq酶和dNTP按一定比例混合,PCR扩增延伸,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。结果 PCR产物经电泳鉴定,可见一条清晰...

            【关键词】 二聚体基因克隆,聚合酶链反应

            浏览:216 被引:3 下载:4
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            【中文期刊】 姜文灿  岳素文  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 107-114页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在 TaqMan 探针法实时荧光定量 PCR 中,排除由引物探针聚合延伸引起的假阳性问题以及由引物二聚体(Primer Dimer,PD)引起的假阴性问题。首先对不同探针进行引物探针聚合实验;然后通过双重 PCR 的干扰实验选择合适的内标基...

            【关键词】 实时荧光定量 PCRTaqMan 探针反义碱基

            OA
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            【中文期刊】 林艳  李照熙  等 《新乡医学院学报》 2012年29卷6期 417-418,421页ISTICCA

            【摘要】 目的 提供一种去除聚合酶链式反应( PCR)引物二聚体的简便方法.方法 根据聚乙二醇(PEG)能够选择性沉淀DNA片段的原理,确定分别去除100 bp、100~200 bp、100~300 bp条带的PEG 6000最终质量分数,因引物二聚...

            【关键词】 聚乙二醇6000二聚体聚合酶链式反应

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            【中文期刊】 许洁  张科平  等 《临床与实验病理学杂志》 2021年37卷3期 354-356页ISTICPKUCA

            【摘要】 二代测序(next generation sequencing,NGS)技术能够同时对上百万乃至数十亿个DNA分子进行测序,相较于传统测序技术,其速度较快、一次可检测大量靶基因,因而广泛应用于染色体非整倍体无创产前筛查、肿瘤靶向治疗基因突变...

            【关键词】 二代测序文库二聚体

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