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            【中文期刊】 肖庚富 齐义鹏  等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷1期 96-98页 SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 介绍一种质粒DNA快速转化方法.质粒DNA加入感受态细胞,冰浴3~10min,涂布预热到37℃的平板,即可获得与常规转化方法相当的转化效率.操作步骤由5步减至2步,时间由2h减至3~10min.同时探讨了Ca2+浓度、4℃保存时间等因素对感...

            【关键词】 质粒转化感受细胞

            浏览:207 被引:17 下载:21

            【中文期刊】 王永刚 孙尚琛  等 《微生物学杂志》 2016年36卷2期 20-24页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为研究金属离子诱导下感受态细胞形成的机理及揭示转化发生的机制,分别用 Ca2+和 Sr2+(0~140 mmol/ L)制备大肠埃希菌感受态细胞并转化。研究结果表明,不同浓度的 Ca2+和 Sr2+诱导的感受态细胞的效价不同,两种金属离子对...

            【关键词】 Ca2 +Sr2 +通透性

            浏览:145 被引:1 下载:4

            【中文期刊】 吴行伟 刘泽源  等 《中国药理学通报》 2012年28卷4期 584-587页 ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 比较几种常用大肠杆菌感受态制备方法,探讨影响pBV220-PTD-tCNTF转化大肠杆菌感受态细胞的因素并得出最优水平组合.方法 采用4种制备感受态细胞的方法即CaCl2法,CaCl2 -甘油法,TSSG法和INOUE法,比较4种方法...

            【关键词】 感受细胞大肠杆菌正交设计

            浏览:652 被引:3 下载:14

            【中文期刊】 李瑞芳 薛雯雯  等 《生物技术通报》 2011年5期 227-230页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进.用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DBl342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细...

            【关键词】 枯草芽孢杆菌感受细胞质粒转化方法

            浏览:658 被引:77 下载:21

            【中文期刊】 朱森康 黄磊  等 《生物技术通报》 2011年10期 206-209页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在建立一种高效大肠杆菌电转化感受态细胞的制备方法,研究了摇瓶装液量,菌体生长阶段,转化电场强度,转化后复苏时间以及感受态细胞存放时间等对转化效率的影响.结果表明,基液量为400 mL/2L,菌体在OD600值为0.452时收集所制备的感受...

            【关键词】 大肠杆菌电转化感受细胞

            浏览:500 被引:30 下载:34

            【中文期刊】 周传文 李倩君  《中国组织工程研究与临床康复》 2010年14卷41期 7687-7690页 ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:研究表明Snai1和E-钙黏素在肿瘤组织中有负向表达关系,且与Snai1与CDH1启动子区box盒结合,抑制CDH1基因转录.目的:构建针对snai1的高表达载体,建立稳定转染的细胞株.方法:根据GenBank中snai1的基因序列人...

            【关键词】 锌指转录因子snai1表达质粒感受细胞

            浏览:212 被引:1 下载:22

            【中文期刊】 王友如  《生物技术》 2011年21卷1期 47-49页 ISTICCA

            【摘要】 目的:质粒DNA转化时,比较不同的冰浴时间、热休克时间、预培养时间对转化效率的影响.优化质粒DNA转化方法,缩短了转化时间,该方法可获得与常规转化方法相当的转化效率.方法:质粒DNA加入感受态细胞中,混匀冰浴5min,42 ℃热休克60s,...

            【关键词】 质粒转化优化

            浏览:284 被引:2 下载:70

            【中文期刊】 薛亮亮 司苏晋  等 《山西医科大学学报》 2010年41卷4期 322-324页 ISTICCA

            【摘要】 目的 观察甲基化缺陷的大肠杆菌DM1菌株与普通DH5α菌株感受态转化效率的差别.方法 用常规氯化钙法制备二者的感受态细胞,质粒转化后计算转化率.结果 DM1菌株感受态细胞转化率为(2.2±0.3)×106 CFU/μg,DH5α菌株感受态细...

            【关键词】 感受细胞甲基化DM1

            浏览:450 被引:1 下载:4

            【中文期刊】 顾长国 贾淑芳  等 《西南国防医药》 2009年19卷5期 507-508页 ISTICCA

            【摘要】 目的:优化外源性DNA导入XL1-blue菌株电转化条件,摸索构建噬菌体抗体库构建过程较优化的电转化条件.方法:培养XL1-blue菌株,在不同培养时间制作感受态细胞,应用不同电压分别作电转化,并对其转化效果进行鉴定,确定较好的培养时间和电...

            【关键词】 电转化抗体库感受细胞

            浏览:107 被引:4 下载:0

            【中文期刊】 张晓楠 肖玉  等 《中国现代医学杂志》 2008年18卷4期 466-468,472页 ISTICCA

            【摘要】 目的 探讨影响大肠杆菌DH5 a电转化效率的几个关键但易被忽略的因素.方法 于室温(25℃)用空气浴振荡和水浴振荡培养大肠杆菌DH5 a,用10%(V/V)甘油-水溶液和10%(V/V)甘油-生理盐水溶液冻存所制感受态细胞.在电压2.5kv...

            【关键词】 感受细胞大肠杆菌DH5 a电穿孔

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