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            【中文期刊】 王柳月  李慧美  等 《生物技术通报》 2019年35卷12期 196-202页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 平行模板法简化重叠延伸PCR定点突变流程的思路不能成立,靠近DNA末端的低效限制性酶切才是制约其突变效率的核心原因.故以旁侧引物法提高DNA产物的酶切效率,增加定点突变的成功率.将上、下游引物匹配位点由两侧酶切位点外延50-100 bp,使...

            【关键词】 重叠延伸PCR定点突变旁侧引物

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            【中文期刊】 杨柳  汪小菀  等 《吉林大学学报(医学版)》 2015年41卷3期 656-661页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建pGEX-4T-1/ hZimp10重组质粒,并在大肠杆菌中表达,纯化出GST-hZimp10融合蛋白,用以制备抗hZimp10抗体.方法:采用PCR技术以pcCDNA3.1-Flag-hZimp10为模板,扩增出hZimp10蛋...

            【关键词】 hZimp10谷胱甘肽硫转移酶融合蛋白多克隆抗体

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            【中文期刊】 刘彤  李洋  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷3期 437-440页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)的各个截短区域原核表达质粒,并诱导和鉴定其融合蛋白的表达,为探讨PAK6基因的生物学功能提供依据.方法:以真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-PAK6为模板,PCR扩增出PAK6基因的各个截短片段....

            【关键词】 P21活化激酶截短区域原核表达质粒

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            【中文期刊】 李锐  王文国  等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷8期 30-35页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对金发草(Pogonatherum paniceum)第3组LEA蛋白(PpLEA3)基因两个剪接体进行分析,并利用酿酒酵母表达系统分析两个剪接体在不同非生物胁迫的响应差异.以PpLEA3基因两个剪接体(PpLEA3.a和PpLEA3.b)...

            【关键词】 LEA3基因金发草可变剪接

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            【中文期刊】 肖智  吴炜  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷10期 1064-1066页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建HPC2不同截短功能片段的真核表达载体,并检测各片段在骨肉瘤U2OS细胞中的表达.方法:以质粒pcDNA3.2-V5/HPC2为模板,分别设计各片段PCR引物进行扩增,EcoR I酶切鉴定PCR产物,正确的PCR产物进行连接后转化...

            【关键词】 HPC2基因表达截短功能域

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            【中文期刊】 郑英  盛树东  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷6期 626-628页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人NYD-SP28基因原核表达载体,表达其原核蛋白,制备其多克隆抗体,以探讨其在精子发生中的作用.方法:以原始质粒为模板,用PCR法扩增人的NYD-SP28基因开放阅读框全长,将其克隆到原核表达质粒pET28a(+)中,构建重组质...

            【关键词】 NYD-SP28基因原核表达多克隆抗体

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            【中文期刊】 杨公进  马中瑞  等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷10期 83-87页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:利用λ噬菌体Red重组系统敲除大肠杆菌O157∶H7的waaL基因.方法:以pKD4为模板扩增出与waaL基因上下游同源的、含有卡那霉素抗性基因的PCR产物.然后电击转化到大肠杆菌O157∶H7中,利用Red重组系统,通过卡那霉素抗性...

            【关键词】 O157∶H7λ-Red重组系统waaL基因

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            【中文期刊】 夏嵩  张成武  《中国生物工程杂志》 2011年31卷5期 126-130页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 硅藻是一类微小的单细胞藻类,具有由无定形氧化硅组成的坚硬细胞壁(硅壳).硅壳具有精致的形态和结构,且随硅藻种类和生长条件不同而千变万化.目前估算的硅藻种类超过200 000种,其独特的纳米结构对光子结构、化学生物传感器、新纳米材料和器件的开...

            【关键词】 硅藻生物材料生物光子结构

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            【中文期刊】 马小松  刘金钊  等 《中国矫形外科杂志》 2011年19卷10期 851-854页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]构建骨形态发生蛋白BMP2和转化生长因子TGFβ3双基因真核表达载体.[方法]从人胚胎组织提取总RNA,反转录成cDNA,以pGEMT/BMP2和反转录的cDNA为模板,PCR扩增出BMP2和TGFβ3两个基因全长,将两个基因片段分...

            【关键词】 BMP2TGFβ3真核表达载体

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            【中文期刊】 郝欣  肖冬光  等 《微生物学报》 2010年50卷8期 1030-1035页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]通过构建酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失的工程菌株,研究该基因对酿酒酵母浓醪发酵产高级醇特别是异戊醇的影响.[方法]以酿酒酵母工业菌株AY-15的单倍体a-8或α-22的基因组DNA为模板,PCR分别扩增YDL080...

            【关键词】 酿酒酵母类丙酮酸脱羧酶类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)

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