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【中文期刊】 邵晓云 徐绍业  《四川动物》 2010年29卷2期 288-291页 ISTICPKU

【摘要】 为探讨适合水牛胎儿成纤维细胞(BFF)的体外培养体系,采用常规组织块法和胰蛋白酶消化法原代培养BFF均获得了较多的成纤维细胞,但后者所得细胞的活力不如前者高,且死细胞也较多;传代或冻存成纤维细胞时用4℃预冷的胰蛋白酶室温下消化所得的细胞比3...

【关键词】 水牛； 胎儿； 成纤维细胞；

【中文期刊】 邵晓云 徐绍业  《实用医学杂志》 2010年26卷2期 183-185页 ISTICPKUCA

【摘要】 目的:探讨胰岛素和务件培养液对低密度水牛胎儿成纤维细胞增殖的影响.方法:根据是否添加胰岛素(2IU/mL)或条件培养液.以及成纤维细胞的培养密度(1、2、4、6、8个/滴),分15个处理组.结果:胰岛素(2 IU/mL)培养液组细胞的平均增...

【关键词】 胰岛素； 条件培养液； 培养；

【中文期刊】 邵晓云 徐绍业  《中国现代医学杂志》 2010年20卷1期 18-21页 ISTICCA

【摘要】 目的 探讨不同的血清饥饿方法和饥饿时间对水牛胎儿成纤维细胞(BFF)周期的影响.方法 用血清直接饥饿和梯度饥饿处理水牛胎儿成纤维细胞.结果 血清直接饥饿处理或梯度饥饿处理后其G_0/G_1期成纤维细胞的比例均显著高于一般培养组[(88.40...

【关键词】 血清饥饿； 胎儿成纤维细胞； 细胞周期同步化；

【中文期刊】 上官陶 张勃伟  等 《畜牧兽医学报》 2011年42卷10期 1374-1379页

【摘要】 本研究旨在构建溶葡萄球菌素基因牛乳腺特异表达载体(pEPB),转染牛胎儿成纤维细胞,为制备溶葡萄球菌素基因的转基因克隆牛提供核供体细胞.本研究以pEGFP-C1为载体骨架,通过PCR扩增牛2.6 kb的β-酪蛋白5′调控区及0.6 kb的3...

【关键词】 溶葡萄球菌素基因； 乳腺特异表达； 牛乳腺上皮细胞；

【中文期刊】 宋永利 何小宁  等 《畜牧兽医学报》 2011年42卷4期 585-592页

【摘要】 为了为核移植提供供体细胞,本研究构建了真核表达载体PEGFP-SRA-Ipr1,并研究了牛胎儿皮肤成纤维细胞的体外分离培养,进行了Ipr1基因转染.克隆Ipr1基因和SR-A启动子,并构建了巨噬细胞特异性真核表达载体.用组织块贴壁法分离培养...

【关键词】 供体细胞； 真核表达载体； Ipr1基因；

【中文期刊】 马晶晶 王勇胜  等 《农业生物技术学报》 2010年18卷4期 707-712页

【摘要】 用脂质体法将含有人B防御素3(hBD3)和绿色荧光蛋白(EGFP)基因的乳腺特异性表达载体pEBB导入牛胎儿成纤维细胞,经G418筛选和PCR鉴定获得阳性细胞,将这些转hBD3基因的阳性细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞,进行PCR鉴定,获得...

【关键词】 人β-防御素(hBD-3)基因； 牛胎儿成纤维细胞； 转基因克隆胚；

【中文期刊】 程胖 张海林  等 《农业生物技术学报》 2010年18卷6期 1091-1097页

【摘要】 疯牛病是由朊蛋白基因prnp编码的正常朊蛋白PrPc发生构象变化为致病性朊蛋白PrPsc而引起的传染性疾病,PrPsc在中枢神经的聚集引发了动物的传染性海绵状脑病.降低(下调)PrPc的表达量使其减少向PrPsc转化,是抑制疯牛病的有效途径...

【关键词】 传染性海绵状脑病； 朊蛋白； RNAi；

【中文期刊】 黄萌 许尚忠  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2011年27卷3期 267-272页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【关键词】 黑素皮质素4受体(MC4R)； RNA干扰； 牛胎儿成纤维细胞；

【中文期刊】 张海林 程胖  等 《生物工程学报》 2010年26卷3期 297-304页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 利用正负筛选策略(Positive-negative selection,PNS)对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一.将动物的朊蛋白基因prnp敲除,使其不能表达朊蛋白(传染性海绵状脑病的致病蛋白),从而使其具有抵抗P...

【关键词】 基因打靶； 正负筛选策略； 朊蛋白；

【中文期刊】 杨东山 杜晨光  等 《动物学研究》 2006年27卷1期 41-47页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP

【摘要】 为获得转基因克隆牛的供体细胞,采用组织块贴附培养的方法分离培养牛胎儿皮肤成纤维细胞,经2～3次传代纯化,绘制生长曲线,分别分析体外传代培养10代以内和20代以上细胞的核型特征.分别采用800、900、1000 V/cm和1、5、10、15和...

【关键词】 牛胎儿成纤维细胞； 分离培养； 电穿孔；