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            【中文期刊】 王勇 诸葛斌  等 《生物学杂志》 2009年26卷3期 1-3页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 有氧条件下,建立了克雷伯杆菌破碎方法及其生产1,3-丙二醇代谢途径中关键酶甘油脱水酶的酶活测定方法.甘油脱水酶酶活测定时在超声时间25min,功率为300w的条件下最适破碎频率为破碎时间1s,停息时间4s;甘油脱水酶酶活测定所用磷酸盐缓冲液...

            【关键词】 1,3-丙二醇克雷伯氏杆菌甘油脱水

            浏览:198 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 李红梅 李英华  等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷5期 46-51页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 将来自于肺炎克雷伯氏杆菌的甘油脱水酶基因插入到质粒pET28(a+)-yqhD的上游,并用SD序列隔开,串联构建重组质粒pET28(a+)dhaBCE-yqhD,转化到大肠杆菌E.coli Novablue中进行共表达.结果显示:含有pET...

            【关键词】 甘油脱水yqhD氧化还原共表达

            浏览:269 被引:1 下载:0

            【中文期刊】 张晓梅 诸葛健  《生物工程学报》 2007年23卷5期 841-845页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用PCR技术扩增来源于弗氏柠檬杆菌(Citrobacter freundii)的甘油脱水酶编码基因dhaB以及甘油脱水酶激活因子编码基因dhaG dhaF,将其与1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的编码基因yqhD串联在温控表达载体pHsh上...

            【关键词】 甘油脱水激活因子重组大肠杆菌1

            浏览:199 被引:7 下载:4

            【中文期刊】 田平芳 谭天伟  《生物工程学报》 2007年23卷2期 201-205页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 微生物发酵生产1,3-丙二醇因对环境友好而成为研究热点.通过对发酵菌种、代谢途径、调节子和关键酶的分析,阐述了微生物转化甘油为1,3-丙二醇的分子机理.尤其对还原途径的限速酶-甘油脱水酶的分子结构及再激活因子进行了详细分析,为菌种的遗传改造...

            【关键词】 1,3-丙二醇甘油脱水再激活因子

            浏览:362 被引:23 下载:5

            【中文期刊】 王宝光 刘铭  等 《中国生物工程杂志》 2006年26卷6期 59-65页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为提高克雷伯氏肺炎杆菌产1,3-丙二醇的能力,以离子束、紫外线和氯化锂为复合诱变法,建立了产酸圈和产物耐受相结合的平板筛选方法,获得可耐受高浓度1,3-丙二醇并且副产物中乙醇含量较少的优良突变菌株2株.与出发菌株相比,两株高产突变菌株Kle...

            【关键词】 克雷伯氏肺炎杆菌离子束注入紫外诱变

            浏览:274 被引:23 下载:0

            【中文期刊】 齐向辉 韦宇拓  等 《工业微生物》 2009年39卷5期 7-12页 ISTICCA

            【摘要】 1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,其生物法生产的研究越来越受到广泛的关注.以克雷伯氏菌的总DNA为模板,通过PCR分别扩增出约1.8 kb的 gdrA 和 0.4 kb的 gdrB 的两个基因片段,随后,将此两基因以多顺反子的方式与 pS...

            【关键词】 甘油脱水激活因子协同表达

            浏览:377 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 陈永胜 刘长江  等 《中国生物制品学杂志》 2008年21卷1期 19-22页 ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 克隆甘油脱水酶α亚基基因,构建表达载体,表达并纯化融合蛋白.方法 采用PCR技术克隆甘油脱水酶α亚基gldA基因,并将其重组到含组氨酸标签的表达质粒pET-32a(+)中.将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱...

            【关键词】 甘油脱水α亚基克隆

            浏览:253 被引:1 下载:4

            【中文期刊】 洪燕 张燎原  等 《生物信息学》 2007年5卷3期 109-112页 ISTIC

            【摘要】 用生物信息学的方法对依赖辅酶B12型甘油脱水酶的各个亚基结构进行了分析,并对其功能进行了探讨.通过对底物未结合时与底物结合后的酶分子构象变化进行分析,探讨了底物的结合对各个亚基的影响.

            【关键词】 甘油脱水B12亚基

            浏览:192 被引:2 下载:0

            【中文期刊】 洪燕 李雯君  等 《生物技术》 2006年16卷4期 1-4页 ISTICCA

            【摘要】 依赖辅酶B12的甘油脱水酶和二醇脱水酶是同工酶.它们不仅氨基酸序列和蛋白质折叠方式非常相似,而且有着相同的催化机制.该文在同一菌株中将编码甘油脱水酶β亚基基因和编码二醇脱水酶β亚基基因片段分别克隆至T载体,从而获得两段核苷酸片段序列,将pd...

            【关键词】 甘油脱水二醇脱水酶催化机制

            浏览:240 被引:2 下载:4

            【中文期刊】 陈永胜 刘长江  等 《工业微生物》 2005年35卷2期 19-23页 ISTICCA

            【摘要】 为了表达及纯化甘油脱水酶β亚基蛋白,采用PCR及DNA重组技术将甘油脱水酶β亚基基因gldB重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果表明,转化重组质粒pMAL/gldB的大肠杆菌经IP...

            【关键词】 甘油脱水gldB基因原核表达

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