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          【中文期刊】 刘喜东  丛宇婷  等 《分析化学》 2015年43卷10期 1551-1557页

          【摘要】 利用带有酶切位点的稳定同位素标记肽段作内标,采取3种方式处理样品,考察了不同的样品处理过程对实验结果准确性的影响.首先合成不同长度的带有酶切位点的肽段,考察其酶解过程,实验结果表明,胰蛋白酶的活性位点具有一定的选择性,最终确定目标肽段两端分...

          【关键词】 稳定同位素标记绝对定量酶切位点

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          【学位论文】 作者:先锋 导师:刘斯奇   吴琳   Peter Roepstorff   中国科学院大学   生物学 生物化学与分子生物学(博士) 2017年

          【摘要】 定量分析是蛋白质组学的核心技术,而绝对量测定则是定量蛋白质组分析的重要一环。基于质谱技术的绝对定量蛋白质组分析,通常采用稳定同位素标记肽段作为测量的标准物质。常用的稳定同位素标记肽段可通过化学合成或蛋白质重组表达的方法获得。然而,这些传统方...

          【关键词】 谷胱甘硫转移酶体外蛋白表达系统

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          【中文期刊】 衣泰龙  田苗苗  等 《安徽医科大学学报》 2014年49卷11期 1595-1599页ISTICPKUCA

          【摘要】 目的 研究具有不同侵袭转移能力的肝癌细胞系的磷酸化蛋白质组的动态变化.方法 首先用含有重稳定同位素标记的精氨酸和赖氨酸的培养基对MHCC97-L进行重稳定同位素标记氨基酸的细胞培养(SILAC);用含有轻稳定同位素标记的精氨酸和赖氨酸的培养...

          【关键词】 定量磷酸化蛋白质组学SILAC固相金属离子亲和色谱

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          【中文期刊】 费哲为  Andrew Rhodes  等 《上海第二医科大学学报》 2002年22卷1期 7-10页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的探讨创伤时给予外源性左旋-2-氧-4-羧噻唑烷(OTZ)以增加机体谷胱甘肽(GSH)合成的可能性,同时利用OTZ检测GSH的水平.方法7只实验兔创伤前后测定机体静息能耗(REE);经颈静脉导管注入稳定同位素标记的13C-OTZ后,在12...

          【关键词】 创伤代谢反应静息能量

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          【中文期刊】 王馨悦  韩冰  《国际检验医学杂志》 2012年33卷20期 2524-2526页ISTICCA

          【摘要】 <篇首> 基于蛋白质组学技术的基础生物研究筛选出了大量蛋白候选标志物,由于缺乏有效的验证手段,阻碍了其在疾病诊断、临床处理和疾病预后中的应用.目前,验证疾病候选标志蛋白主要依赖于免疫学分析方法,如ELISA.但对所有候选标志物都开发ELISA法...

          【关键词】 质谱分析抗体免疫亲和富集

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          【中文期刊】 刘喜东  朱俊  等 《分析化学》 2014年42卷1期 10-15页

          【摘要】 利用蛋白质组学方法,将大鼠肝微粒体样品进行胰蛋白酶水解;再利用液相色谱-串联质谱法(LCMS/MS),采用多反应监测模式(MRM),通过测定蛋白质水解后产生的特征酶切肽段,实现同时对大鼠肝微粒体内药物代谢酶P450和UGT的绝对定量.本实验...

          【关键词】 葡萄糖醛酸转移酶多反应监测肝微粒体

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          【中文期刊】 李楠楠  周廉淇  等 《色谱》 2013年31卷6期 522-530页

          【摘要】 建立了定量肽段串联体蛋白质(concatamers of Q peptides,QconCATs)结合18O同位素标记-多反应监测质谱的蛋白质绝对定量新方法.首先对QconCAT重组蛋白质进行了纯度表征,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(...

          【关键词】 定量串联体蛋白质同位素稀释多反应监测质谱

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          【中文期刊】 赵焱  卢庄  等 《分析化学》 2010年38卷1期 91-94页

          【摘要】 针对~(18)O同位素标记反应两个重要影响因素--肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化.在H_2~(18)O中加入Rapigest~(TM) SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进...

          【关键词】 ~(18)O同位素标记蛋白质组

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          【中文期刊】 隋少卉  王京兰  等 《分析化学》 2008年36卷8期 1017-1023页

          【摘要】 磷酸化蛋白质组学定量分析,要对磷酸化修饰富集技术和定量技术进行研究.基于此,本研究采用18O稳定同位素标记技术对胰蛋白酶酶解肽段混合物进行标记, 并对其标记时间和标记后胰蛋白酶的变性条件进行优化.结果表明:在pH=4~5的KH2PO4缓冲体...

          【关键词】 18O标记技术等电聚焦傅里叶交换离子回旋质谱(LTQ-FTICR-MS)

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          【中文期刊】 刘新  应万涛  等 《分析化学》 2007年35卷12期 1687-1695页

          【摘要】 建立了一种基于生物质谱的乙酸酐稳定同位素标记,定量蛋白质组学研究方法,优化了影响标记效率的各种条件.在pH 8.0的Na2B4O7/H3BO3 缓冲体系中,当乙酸酐摩尔浓度25倍过量于肽段摩尔量,22℃反应30 min时,标记即可完全.对多...

          【关键词】 乙酸酐稳定同位素标记定量蛋白质组学生物质谱

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