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【中文期刊】 孙新明 邱效武 等 《生物技术通报》 2009年z1期 310-314,330页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 探讨山羊精子与外源DNA共孵育转染外源DNA效率的影响因素,优化精子转染程序.用DIG免疫组化方法检测和比较精子转染效率,因素为精子洗涤程度、转染缓冲液、精予活力、BSA、肝素、异种动物精浆等.离心洗涤3次以内的山羊精子DNase Ⅰ消化前...
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【中文期刊】 孙新明 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2013年5期 90-92页
【摘要】 目的探讨供精个体和异种动物精浆对小鼠精子转染外源DNA效率的影响,以探索精子作为外源基因的载体建立转基因小鼠的影响因素。方法从性成熟小鼠的输精管及部分附睾管中取出精子,用DIG免疫组化方法检测和比较精子转染效率,因素为供精个体和异种动物精浆...
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【中文期刊】 字向东 梁冠男 等 《生物技术通报》 2010年8期 168-173页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响.用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下...
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【中文期刊】 赵永聚 《动物学杂志》 2009年44卷3期 141-145页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 精子具有主动结合、转运、整合外源DNA的能力,并在受精时导入卵母细胞,获得转基因动物.精子介导基因转移(sperm-mediated gene transfer,SMGT)是目前获得转基因动物简单而高效的方法之一.精子因素是影响SMGT方法...
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【中文期刊】 游言文 郝莉 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2008年12卷11期 2170-2172页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:精子膜蛋白PH-20分布在精子表面,在受精过程中起重要作用,可作为免疫避孕候选疫苗.采用脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1(+)-hPH20DNA疫苗质粒导入小鼠骨骼肌中,检测目的基因hPH-20在体内的表达水平.方法:实验于20...
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【中文期刊】 韩艳玲 李芳秋 等 《医学研究生学报》 2008年21卷9期 904-906,910,插页1页ISTICPKU
【摘要】 目的:建立人精子蛋白17(hSp17)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)共表达的卵巢癌细胞模型. 方法:用PCR方法获取hSp17基因片段,Hind Ⅲ/Kpn I双酶切、T4 DNA连接酶连接的方法将hSp17基因片段克隆至含报告基因EGF...
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【中文期刊】 董焕声 房勇卫 等 《生物工程学报》 2007年23卷3期 535-539页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用DIG末端标记技术和免疫组化技术分析了小鼠精子体外结合内化外源DNA的效率.试验结果表明,不同小鼠个体的精子结合外源DNA的阳性率有明显差异(P<0.01),平均为13%.利用考马斯亮蓝染色评价了小鼠精子顶体反应发生的情况.筛选出TYH...
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【中文期刊】 臧卫东 陈雪梅 等 《郑州大学学报(医学版)》 2006年41卷4期 634-636页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:研究人精子顶体膜相关蛋白32(hSAMP32)mRNA在体外细胞NIH3T3中的表达.方法:利用RT-PCR及亚克隆技术构建pcDNA3.1(+)-hSAMP32质粒,实验组以脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1(+)-hSAMP3...
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【中文期刊】 王晓梅 阮烨 等 《遗传》 2005年27卷2期 195-200页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 采用共培养和脂质体介导两种方法将金黄地鼠附睾内的精子与NF K B-luc+质粒共孵育后,再与成熟的卵母细胞进行体外受精,用PCR、Southern blot及荧光原位杂交(FISH)等技术检测外源基因在精子细胞和在受精卵中的存在及存在部位...
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