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            【中文期刊】 秦江楠 毕春霞  等 《微生物学杂志》 2014年34卷3期 30-35页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为深入研究smp基因的功能,需构建嗜麦芽寡养单胞菌D2株smp基因缺失株.首先,PCR扩增D2株smp基因上游、下游片段作为上下游同源臂,同时扩增获得氯霉素抗性(cat)基因,采用SOE-PCR方法将各片段连接,然后双酶切后克隆入自杀质粒p...

            【关键词】 嗜麦芽寡养单胞菌自杀质粒同源重组

            浏览:205 被引:2 下载:9

            【中文期刊】 邱桥成 叶颖  等 《生物技术通报》 2012年12期 180-183页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 高度保守的spvB基因,其编码产物具有ADP核糖基转移酶活性,是导致受染后细胞发生凋亡的重要毒力因子.为进一步研究该基因致病机制,构建了鼠伤寒沙门菌spvB基因缺陷突变株.根据GenBank鼠伤寒沙门菌spvB基因序列,用Primer Pr...

            【关键词】 鼠伤寒沙门菌spvB毒力基因同源重组

            浏览:230 被引:1 下载:6

            【中文期刊】 庞丹 王虹  等 《生物技术通报》 2010年5期 126-129,134页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 肺炎链球菌是严重侵袭性感染和上呼吸道感染最重要的条件致病菌之一,分析鉴定体内诱导基因序列变得尤为重要.本研究利用酶切自连法成功从129个体内诱导表达的肺炎链球菌中获得13个融合重组自杀质粒,通过与肺炎链球菌株TIGR4基因组序列的同源性比对...

            【关键词】 酶切自连法自杀质粒肺炎链球菌

            浏览:265 被引:1 下载:49

            【中文期刊】 乔凤 陈泽良  等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷12期 1-5页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 突变株的构建是细菌基因功能研究的前提.构建了一个可用于布鲁氏菌突变株构建的自杀质粒.在pUC19质粒的多克隆位点插入卡那霉素抗性基因,在该基因两侧添加多个酶切位点,构建成为pUC19K.利用该质粒,构建了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因的突变...

            【关键词】 布鲁氏菌自杀质粒突变株构建

            浏览:401 被引:22 下载:5

            【中文期刊】 胡静 俞守义  等 《中国公共卫生》 2003年19卷6期 641-643页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒,并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株.方法根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列,设计PCR引物,扩增并克隆了irp6结构基因,在体外进行精确突变后,插入氯霉素抗性基因...

            【关键词】 毒力岛强毒力岛耶尔森菌

            浏览:263 被引:4 下载:2

            【中文期刊】 郭通 刘雄  等 《生物技术通讯》 2015年26卷3期 321-324页 ISTICCA

            【摘要】 目的:构建无标记的鲍曼不动杆菌pilO基因缺失突变株,通过表型鉴定pilO基因缺失对鲍曼不动杆菌运动能力的影响.方法:PCR扩增pilO基因上下游各1 kb同源臂,连接至pMO130-TelR自杀质粒,质粒转化大肠杆菌S17-1后再接合至鲍...

            【关键词】 鲍曼不动杆菌缺失株自杀质粒

            浏览:142 被引:1 下载:13

            【中文期刊】 凌峰 王晓春  等 《江苏大学学报(医学版)》 2013年23卷5期 369-372,376页 ISTICCA

            【摘要】 目的:构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)细胞毒素相关基因致病岛(cytotoxin associated gene pathogenicity island,cag PAI)中的第1个编码基因hp05...

            【关键词】 幽门螺杆菌细胞毒素相关基因致病岛自杀质粒

            浏览:197 被引:3 下载:17

            【中文期刊】 胡静 俞守义  等 《热带医学杂志》 2005年5卷2期 116-119,123页 ISTICCA

            【摘要】 目的构建耶尔森菌 HPI毒力岛全岛缺失突变载体, 为进一步构建 HPI全岛缺失株打下基础. 方法根据已知小肠结肠炎耶尔森菌 HPI毒力岛基因序列设计 PCR引物,扩增并克隆 irp8结构基因,作为同源重组的一侧序列, 以 irp5的部分序列...

            【关键词】 强毒力岛耶尔森菌自杀质粒

            浏览:307 被引:0 下载:5

            【中文期刊】 葛菁萍 高先军  等 《中国农学通报》 2011年27卷23期 102-108页

            【摘要】 优化副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei) HD 1.7的电转化条件,为构建L.paracasei HD 1.7prcR基因敲除突变株奠定基础.通过电转化方法将自杀质粒pUC18-prcR-tet导入L.paraca...

            【关键词】 副干酪乳杆菌自杀质粒优化

            浏览:0 被引:7 下载:0

            【中文期刊】 闫广谋 王兴龙  等 《中国兽医学报》 2007年27卷5期 690-694,699页

            【摘要】 通过构建自杀质粒,用定向同源重组的方法,把改造的萤火虫萤光素酶报告基因Luc NF+替换布鲁氏菌S19疫苗株Bp26基因部分片段,构建出布鲁氏菌Bp26基因缺失突变株△S19-1.在此基础上,用同样的方法,敲除△S19-1上的毒力基因Bmp...

            【关键词】 布鲁氏菌Bp26分子标记

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