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【中文期刊】 张平静 李忠明 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷4期 106-112页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 介绍了一种成本低、步骤少、简单易行的质粒纯化制检工艺.该工艺选择优势产生超螺旋质粒的大肠杆菌菌株以无蛋白质培养基进行发酵罐培养,采用碱裂解法,对质粒制备过程中所用的层析吸附材料、核酸结合溶液、去除内毒素等杂质的方法和浓缩等步骤进行了实用性改...
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【中文期刊】 王晓芳 陈江曼 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2019年35卷5期 459-464页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 制备纳尔逊海湾病毒(NBV)S3多克隆抗体.方法 首先将构建好的Pris His MB-S3重组基因质粒,转化到大肠杆菌(E coil) BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达.镍柱亲和层...
【关键词】 Pris His MB-S3质粒;纳尔逊海湾病毒(NBV);蛋白纯化;
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【中文期刊】 王恩多 郑勇刚 等 《生物化学与生物物理学报》 2002年34卷4期 526-531页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 假单孢菌sp.130头孢菌素酰化酶催化戊二酰-7-氨基头孢烷酸的水解反应, 生成7-氨基头孢烷酸.7-氨基头孢烷酸是医药工业合成大多数头孢菌素衍生物的起始原料.在6种大肠杆菌表达质粒上构建了表达该酶的不同载体, 得到了不同表达结果的大肠杆菌...
【关键词】 GL-7ACA酰化酶;重组质粒;表达和纯化;
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【中文期刊】 喻放 杨忠华 等 《生物技术通报》 2016年32卷2期 84-89页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建人白细胞介素24(IL-24)原核表达载体并利用ELP-Intein系统表达纯化可溶性的IL-24蛋白.通过PCR扩增不合信号肽的人IL-24基因,将IL-24基因插入pET-ELP-Intein质粒构建重组表达载体pET-ELP-In...
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【中文期刊】 付晓平 王文研 等 《微生物学报》 2012年52卷1期 90-95页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]旨在构建一个能以非色谱纯化目标蛋白的表达质粒,使用自行设计的类弹性蛋白多肽(ELPs)作为非色谱纯化标签,以纯化目标蛋白.该ELPs长度短,对盐非常敏感.[方法]从头设计了木聚糖酶,将其通过一段无规则卷曲同ELPs相连,合成了编码上...
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【中文期刊】 胡春生 王延亮 等 《生物工程学报》 2011年27卷2期 247-252页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 pUDK-HGF是携带人肝细胞生长因子的裸质粒,目前已进入Ⅰ期临床试验,因此需要大量符合药学规格的质粒DNA.文中建立了pUDK-HGF中试规模纯化制备的新工艺.流程包括:发酵、离心收获菌体、碱裂解、超滤浓缩碱裂解液、Sephacryl S...
- 概要:
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【中文期刊】 胡春生 张庆林 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷4期 119-123页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基因治疗已成为21世纪一些重大疾病的有效治疗策略,目前携带治疗基因的重组质粒已作为基因药物进入临床研究.对用于基因治疗的生物制品的生产与质量控制都有相当严格的要求.虽然已建立大规模符合药学规格的质粒DNA生产工艺,能满足临床需求,但在这些生...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 庞浩 封毅 等 《微生物学通报》 2009年36卷5期 768-772页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究.我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法,这个方法通过使用Sephadex G200+酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA...
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【中文期刊】 吴能表 薛莲 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2009年25卷10期 958-962页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 质粒的分离纯化在分子生物学实际工作中占有重要地位.本文采用氧化硅包裹的磁性纳米粒子,平均粒径为20 nm左右,在外加磁场的作用下,从细胞粗提掖中快速分离质粒DNA.用这种方法成功地从大肠杆菌DH5α浓缩和纯化得到了pUC19质粒,该质粒具有...
【关键词】 氧化硅包裹的磁性纳米粒子;质粒DNA;分离纯化;
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【中文期刊】 饶桂荣 石燕飞 等 《中国生物制品学杂志》 2015年28卷10期 1084-1088页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 提取、纯化靶向治疗肺癌的质粒TV-BIKDD,并进行质量检定.方法 采用碱裂解法对工程菌DH5α/TV-BIKDD菌体进行质粒初提,通过两步整体柱层析(离子柱层析和疏水柱层析)进行质粒纯化,并检测质粒含量、DNA超螺旋比例;用该方法连...
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