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            【中文期刊】 吴立柱  郑海洲  等 《生物学通报》 2004年39卷10期 53-54页ISTICCA

            【摘要】 碱裂解法是进行分子克隆实验中质粒DNA制备最为常用的方法.在实际实验操作过程中,对该实验方法进行了改进,改进的碱裂解法解除了所提质粒DNA中RNA污染及RNase的可能影响,快速提取法使阳性克隆的筛选更加迅速,快捷.两种方法的改进使实验更加...

            【关键词】 质粒DNA制备快速提取法碱裂解法

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            【中文期刊】 王晓玲  郭明飞  等 《医学理论与实践》 2024年37卷11期 1805-1807,1817页

            【摘要】 目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112 蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体.方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112 个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pE...

            【关键词】 人5-脂氧合酶包涵体蛋白亲和纯化

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            【中文期刊】 陈孟璋  何星垚  等 《广东药科大学学报》 2023年39卷5期 87-92页ISTICCA

            【摘要】 目的 比较不同的定量方法和总DNA制备方法对实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)测定治疗性HBV DNA疫苗工程菌的质粒拷贝数(plasmid copy number,PCN)的影响,为建立快速简...

            【关键词】 HBV疫苗DNA疫苗实时定量PCR

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            【中文期刊】 冯改丰  靳辉  等 《中南大学学报(医学版)》 2012年37卷3期 290-295页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:原核表达并纯化含β -淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)氨基段15肽(Aβ115)和删除c/el表位的截断型HBcAg的融合蛋白,观察其形成的病毒样颗粒,检测其免疫原性,为阿尔茨海默病(Alzheimer'sdise...

            【关键词】 β-淀粉样肽(A β)HBcAg融合蛋白

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            【中文期刊】 李国辉  唐琦  等 《微生物学杂志》 2011年31卷4期 90-94页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 通过Primer Premier 5.0设计1对特异性引物,用于扩增家蚕核型多角体病毒囊膜蛋白GP64的部分DNA片段,对PCR扩增得到的DNA片段进行纯化,并对纯化后的双酶切DNA片段与经同样双酶切后的原核表达载体pET28a进行连接;对...

            【关键词】 家蚕核型多角体病毒GP64基因GP64蛋白

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            【中文期刊】 张风荣  侯加法  《中国骨质疏松杂志》 2009年15卷7期 521-524页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 制备地高辛标记的禽OPG cRNA探针.方法 将目的片段重组到T载体中,构建chOPG/pGM-Teasy重组质粒,EcORI酶切鉴定并测序验证.分别用SalI和NcoI进行酶切得到线性化DNA模板,用Sp6和T7 RNA聚合酶体外转...

            【关键词】 体外转录地高辛标记chOPG

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            【中文期刊】 莫永炎  刘亚伟  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年19卷2期 168-172页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为进一步研究人的一新蛋白--蛋白激酶C相关激酶1相关蛋白(AWP1)的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行GST-AWP融合蛋白表达载体的构建、原核表达、纯化及其抗体的制备.采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增A...

            【关键词】 人ECV304细胞,蛋白激酶C相关激酶1相关蛋白 cDNA,GST-融合蛋白,多克隆抗体

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            【中文期刊】 李红红  曹东升  等 《安徽医学》 2011年32卷12期 1993-1995页ISTIC

            【摘要】 目的 利用基因工程技术构建的pcDNA31-VEGF121真核表达质粒,制备由12-烷基化壳聚糖包裹的纳米粒,并将其在体外对基因DNA的保护作用进行检验. 方法 采用碱裂解法白转化阳性细菌菌液中提取出pcDNA3.1-VEGF121真核表达...

            【关键词】 烷基化壳聚糖血管内皮生长因子

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            【中文期刊】 陈猛  熊蔚俐  等 《天津医科大学学报》 2010年16卷3期 392-394,409页ISTIC

            【摘要】 目的:通过构建重组大鼠TSHα链原核表达系统及表达产物的纯化工作,获得重组GST-rrTSHα融合蛋白,以备作为免疫原制备抗大鼠TSHα链的抗体.方法:提取大鼠垂体组织总RNA,RT-PCR扩增大鼠TSHα链编码序列,构建pGEX-3X/T...

            【关键词】 促甲状腺激素α链表达

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            【中文期刊】 胡大强  陈亮  等 《中国药师》 2009年12卷10期 1351-1353页ISTICCA

            【摘要】 目的:为便于人干扰素γ功能研究,制备6His修饰的人干扰素γ.方法:采用一步反向PCR扩增编码人干扰素γ的cDNA序列,克隆到质粒pUC19,测序鉴定正确后构建于pQE80L表达质粒,BamHⅠ和HindⅢ双酶切,行1.2%琼脂糖凝胶电泳鉴...

            【关键词】 人干扰素γ表达蛋白纯化

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