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【中文期刊】 苑丽娜 王定和 等 《生物技术通讯》 2011年22卷6期 864-866页ISTICCA
【摘要】 目的:建立一种适用于酵母双杂交系统的简便快捷的酵母质粒提取方法.方法:以酿酒酵母为供试材料,用玻璃珠振荡法破除酵母细胞壁,提取酵母总DNA,最后通过电转化大肠杆菌DH10B获得目的质粒.结果:粗提得到的质粒可直接转化DH10B,作为模板用于...
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【中文期刊】 熊福银 林艳丽 等 《生物技术通讯》 2009年20卷3期 386-387页ISTICCA
【摘要】 目的:建立一种经济有效、快速简便、稳定的提取酵母质粒的方法.方法:用葡糖苷酸酶消化酵母细胞壁以获取原生质体,然后采用碱裂解法裂解原生质体以获得质粒.结果:与采用商品化离心柱法试剂盒所提取的质粒相比,用该法获取的酵母质粒在PCR分析及转化效果...
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【中文期刊】 张怡 刘坤 等 《食品与生物技术学报》 2013年32卷11期 1194-1198页
【摘要】 质粒提取是遗传工程操作的重要步骤.酵母细胞壁坚韧,不易破壁,使酵母质粒提取变得非常困难.为了获得一种快速、简便、高效、稳定的提取酵母质粒的方法,利用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白测定仪和PCR扩增等方法,对玻璃珠液氮法、蜗牛酶法和试剂盒法提取的酵...
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【中文期刊】 刘国强 孙文浩 等 《生物学杂志》 2020年37卷2期 10-13页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)是应用最为广泛的外源蛋白表达系统之一.目前使用最多的外源蛋白表达策略是使用整合型质粒;游离型质粒由于其高不稳定性,在毕赤酵母中的应用受到极大的限制.将ARS/CEN等元件连接到pPIC9K载体...
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【中文期刊】 战映璇 王环 等 《精准医学杂志》 2022年37卷4期 342-346页
【摘要】 目的 利用巴斯德毕赤酵母获得具有可溶性、免疫原性的重组PD-L1蛋白.方法 根据巴斯德毕赤酵母表达系统的密码子使用偏好,优化人PD-L1基因序列,将优化后的序列构建至质粒pPIC9K,合成重组质粒pPIC9K-PDL1.使用SacⅠ-HF将...
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【中文期刊】 凌小雅 贾瑞璞 等 《黑龙江畜牧兽医》 2021年10期 5-9页
【摘要】 为了研究猪红细胞CR1-like与补体片段C3b的互作关系,试验构建符合酵母双杂交系统要求的重组质粒pGADT7-C3b,对合成的含C3b基因片段的质粒进行双酶切鉴定,运用基因重组技术将鉴定正确的C3b基因与表达载体pGADT7 连接并转化...
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【中文期刊】 单颖 吴学敏 等 《微生物学杂志》 2014年34卷3期 61-65页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 探讨人防御素6(HD-6)在毕赤酵母中表达的可行性,为进一步研究HD6的功能提供理论依据和实验基础.采用PCR方法,设计引物从cDNA文库中扩增出人α防御素6基因片段,并将其插入到克隆载体pMD-18T中,再与毕赤酵母表达载体pPICZαA...
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【中文期刊】 孙静 贾奋 等 《华西口腔医学杂志》 2012年30卷2期 115-118页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建能够稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的白色假丝酵母菌菌株,以便对目的基因进行示踪.方法 构建pACT1-GFP质粒,以白色假丝酵母菌CAI4菌株作为感受态进行转化培养后,分别观察绿色荧光蛋白在两相型下的表达情况.结果 含有pACT1...
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【中文期刊】 马建荣 余永红 等 《生物学杂志》 2011年28卷5期 60-64,69页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用PCR的方法对AGAP(anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽)的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影响的氨基酸作为linker...
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【中文期刊】 黄宪章 张战锋 等 《实用医学杂志》 2011年27卷16期 2917-2919页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的胞外分泌型pPICZαA-CDK2重组质粒,利用毕赤酵母表达体系表达CDK2蛋白.方法:从人白细胞中提取总RNA,逆转录后采用聚合酶链反应扩增出CDK2基因,并将其插入pPICZαA质粒,构建...
【关键词】 细胞周期蛋白依赖激酶2；重组质粒；毕赤酵母；
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