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【中文期刊】 赵更香 袁彩 等 《生物化学与生物物理进展》 2006年33卷4期 377-381页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用重叠延伸PCR方法扩增尿激酶催化结构域的突变体基因片段,将其克隆至表达载体pPICZαA上,转化酵母X-33,用Zeocin筛选高拷贝数的酵母菌落.重组蛋白通过阳离子琼脂糖柱纯化,纯度达到99%,该仅含尿激酶催化结构域的突变体(C279...
【关键词】 尿激酶；Pichia pastoris；纤溶酶原；
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【中文期刊】 李文月 高爽 等 《口腔医学研究》 2018年34卷5期 490-494页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建变形链球菌 (S.mutans) 耐氟菌株UA159-FR中gtfB基因失活株, 为研究耐氟菌株gtfB基因的功能奠定基础.方法:培养UA159-FR并以其为模板扩增gtfB基因上游、下游同源臂片段, 以质粒pEGFP-N1为模板...
【关键词】 变形链球菌耐氟菌株；gtfB基因；重叠延伸聚合酶链反应；
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【中文期刊】 罗汉将 徐云峰 等 《中国康复理论与实践》 2017年23卷2期 166-172页ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 以大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)基因3'非编码区(UTR)为研究对象,构建含有ERK1基因3'UTR区的野生型以及突变型重组双荧光素酶报告载体,通过分析双荧光素酶报告载体的活性,明确rno-miR-15b-5p对报告载体的调节作...
【关键词】 rno-miR-15b-5p；细胞外信号调节激酶1；重叠延伸聚合酶链式反应；
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【中文期刊】 刘鑫 良雪 等 《实用医学杂志》 2016年32卷16期 2621-2624页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：BCR-ABL SH3结构域双位点突变体构建，探讨其促进CML细胞株凋亡机制，为CML治疗奠定基础。方法：采用重叠延伸PCR 扩增双突变体，构建含ABL SH3双突变基因的重组腺病毒载体，流式细胞术分析突变体对KCL22细胞凋亡的影响...
【关键词】 BCR-ABL融合蛋白；重叠延伸PCR；KCL22细胞；
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【中文期刊】 曹文萍 苑海刚 等 《眼科新进展》 2015年35卷6期 525-528页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础.方法 应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转...
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【中文期刊】 鲁战胜 郭丽丽 等 《中国肺癌杂志》 2014年3期 183-188页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 背景与目的已有的研究证明nm23-H1基因是一个重要的肿瘤转移抑制基因，但其抑制肿瘤转移的生化机理尚不完全清楚。Nm23-H1基因结构和功能异常与肿瘤的侵袭转移有密切关系。我们前期已构建了nm23-H1的短发夹RNA（short hairp...
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【中文期刊】 赵志英 朱宏谦 等 《中国药理学通报》 2013年29卷5期 733-736页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建Kir2.1/ Kir2.3通道嵌合体,为进一步研究Kir2.1和Kir2.3通道的调控机制打下基础.方法 利用重叠延伸PCR方法构建不同的Kir2.1/ Kir2.3嵌合体质粒:N1P3C3,N3P1C1,N3P3C1,N1P1...
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【中文期刊】 付畅 林海龙 等 《生物技术通报》 2012年7期 36-40页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 定向进化已广泛应用于蛋白质的分子改造,是改善蛋白质特性的最有效策略之一.为了获得更高的突变效率,构建含有更多突变体的文库,不断地发明创新各种高效的蛋白质体外定向进化方法.对近年来出现的几种定向进化方法三核苷酸突变(TriNex)、序列饱和突...
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【中文期刊】 张毅 周淑艳 等 《生物技术通报》 2012年3期 173-178页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用重叠延伸PCR技术扩增EB病毒BZLF1N-BLRF2融合基因,构建原核表达载体pGEX-4T-1-BZLF1 N-BLRF2,并进行了蛋白的诱导表达.通过序列测定和ORF软件分析,该融合基因含有1个1005bp的ORF,编码335个氨...
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【中文期刊】 张超 刘国炳 等 《南方医科大学学报》 2011年9期 1513-1517页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 应用降落和重叠延伸PCR法构建对肿瘤干细胞有特异靶向性的高效载体-复制缺陷型腺病毒载体，观察其对CD133+人大肠癌细胞株SW480的感染效率。方法利用重叠延伸PCR技术扩增5型腺病毒纤毛球端HI环两端的基因序列，定向插入真核表达质粒...
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