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【中文期刊】 王永飞 邓博文 等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷2期 689-699页
【摘要】 [目的]克隆绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)EF-Tu基因,原核表达获得EF-Tu蛋白,制备抗EF-Tu蛋白的兔源多克隆抗体,为研究肺炎支原体EF-Tu蛋白的结构和功能奠定基础.[方法]采用重叠延伸P...
【中文期刊】 焦凤娟 刘俊杰 等 《吉林大学学报（医学版）》 2022年48卷5期 1109-1115页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:基于重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建转录因子EB(TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化.方法:根据SOE PCR技术原理设计突变引物,以pGEX-6p-1-TFEB质粒为模板,分别采用外侧引物...
【中文期刊】 刘璨 姚亭秀 《生物学通报》 2022年57卷6期 46-50页 ISTICCA
【摘要】 PCR技术是现代分子生物学研究中最常用的技术,自1986年发明至今,在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多新PCR技术,本文对5种常用PCR技术进行简介.
【中文期刊】 赵更香 袁彩 等 《生物化学与生物物理进展》 2006年33卷4期 377-381页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用重叠延伸PCR方法扩增尿激酶催化结构域的突变体基因片段,将其克隆至表达载体pPICZαA上,转化酵母X-33,用Zeocin筛选高拷贝数的酵母菌落.重组蛋白通过阳离子琼脂糖柱纯化,纯度达到99%,该仅含尿激酶催化结构域的突变体(C279...
【关键词】 尿激酶； Pichia pastoris； 纤溶酶原；
【中文期刊】 刘鑫 良雪 等 《实用医学杂志》 2016年32卷16期 2621-2624页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的：BCR-ABL SH3结构域双位点突变体构建，探讨其促进CML细胞株凋亡机制，为CML治疗奠定基础。方法：采用重叠延伸PCR 扩增双突变体，构建含ABL SH3双突变基因的重组腺病毒载体，流式细胞术分析突变体对KCL22细胞凋亡的影响...
【关键词】 BCR-ABL融合蛋白； 重叠延伸PCR； KCL22细胞；
【中文期刊】 曹文萍 苑海刚 等 《眼科新进展》 2015年35卷6期 525-528页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础.方法 应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转...
【中文期刊】 曹文萍 苑海刚 等 《眼科新进展》 2015年35卷6期 525-528页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础.方法 应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转...
【中文期刊】 郑雨桐 闫美田 等 《临床检验杂志》 2020年38卷12期 881-885页 ISTICCA
【摘要】 目的 采用2种重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将5种立克次体目的 基因片段进行融合,同时对2种方法 进行比较.方法 采用一步法及两步法融合基因技术,对5种立克次体融合基因进行构建,并优化一步法中重叠引物浓度以及两步法中各靶基因产物加入量...
【中文期刊】 陈尚良 刘正婷 等 《检验医学与临床》 2020年17卷12期 1659-1661,1665页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建3种常见的CD36基因突变质粒,为建立高分辨率熔解曲线方法 提供突变标准品.方法 选取广州人群常见的CD36基因突变位点A1237C、C268T及329-330delAC作为研究位点,采用重叠延伸PCR方法 及TA克隆技术构建含有...
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