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【中文期刊】 姜立春 郭晓萍 等 《华西药学杂志》 2007年22卷3期 295-297页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究基因工程菌E.coli TOP10F'在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性.方法 以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱和重组嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)的表达量和酶活性为指标进行考察,以评价工程菌的稳定...
【关键词】 重组嘧啶核苷磷酸化酶；质粒稳定性；表达稳定性；
- 概要：
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【中文期刊】 雷高新 陈勇 等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷12期 77-81页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为提高乳清酸到尿嘧啶核苷酸(UMP)的转化效率,利用PCR方法扩增酿酒酵母乳清酸磷酸核糖转移酶基因URA5,并将其连接到携带乳清苷酸脱羧酶基因URA3的表达载体pYX212中,构建了重组质粒pYX212-URA5,然后转化到酿酒酵母BJX1...
【关键词】 乳清酸磷酸核糖转移酶；乳清苷酸脱羧酶酿酒酵母；生物催化；
- 概要：
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【中文期刊】 姜立春 韩文君 等 《华西药学杂志》 2007年22卷6期 600-604页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 鉴定、构建并高效表达从土壤中筛选到的一株耐热型、高活性的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase).方法 以MY02总DNA为模板,通过简并PCR、特异PCR引物、筛选和DNA测序,在5'引物和3'引物中分别引Nco I和Xba I酶切位点,...
【关键词】 Exiguobacterium；嘧啶核苷磷酸化酶；高效表达；
- 概要：
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【中文期刊】 黄炯威 莫世艺 等 《中国药业》 2014年23卷7期 22-24页ISTICCA
【摘要】 目的 优化核苷磷酸化酶(包括嘌呤和嘧啶核苷磷酸化酶)基因工程菌的发酵表达条件.方法 通过工程菌摇瓶培养,测定吸光度D值,考马斯亮蓝(Bradford)法测定蛋白,SDS-PAGE电泳和凝胶成像扫描分析表达量,优化表达条件;通过正交试验优化5...
- 概要：
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【中文期刊】 姜立春 罗英 等 《生物技术通讯》 2007年18卷2期 252-254页ISTICCA
【摘要】 目的:优化嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)基因工程菌的发酵条件.方法:通过工程菌摇瓶培养、测定吸光度D值、凝胶灰度扫描分析表达量.结果:当起始pH值为7.0～7.2,以60/500 mL的装液量、5%的接种量,于32℃培养3 h,加入终浓...
- 概要：
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【中文期刊】 魏元刚 倪孟祥 等 《药物生物技术》 2007年14卷2期 94-98页ISTICCA
【摘要】 实现产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)嘧啶核苷磷酸化酶(Pyrimidine-nucleoside phosphorylase,PyPNase)基因在大肠杆菌中的高效表达.用来源于产气肠杆菌的核苷磷酸化酶N末端序列与...
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【中文期刊】 苏运贞 王一飞 等 《生物技术》 2003年13卷2期 6-8页ISTICCA
【摘要】 软琼脂集落形成实验检测rhNDPK-α对乳腺癌细胞株MCF-7/S集落形成率的影响,结果表明,MCF-7/S集落形成率随rhNDPK-α浓度增高下降,提示rhNDPK-α可能具有抑制乳腺癌细胞株MCF-7/S转移作用;MTT法检测rhNDP...
- 概要：
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【中文期刊】 姜立春 阮期平 等 《绵阳师范学院学报》 2008年27卷5期 60-64页
【摘要】 本实验对重组PyNPase基因工程茵诱导表达,超声波破碎后上清液进行了分离与纯化,采用革兰氏染色法观察和活茵计数法检测破碎效率.超声波破碎上清液经Ni-亲和层析进行分离纯化,最后用SDS-PAGE和磷酸化反应进行了鉴定.结果表明,高效表达的...
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