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【中文期刊】 于梅 周建光 等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷4期 359-364页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 重组工程是近几年发展的新型遗传工程技术.以PCR扩增的线性低拷贝质粒pACYCl84为载体,用Gap-repair方法从大肠杆菌DY330染色体上直接体内亚克隆了包括Red重组酶基因在内的长约6.7kb的基因序列,构建了pYM-Red重组质...
【关键词】 重组工程；Red重组系统；Gap-repair；
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【中文期刊】 周建光 洪鑫 等 《遗传学报》 2003年30卷10期 983-988页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 随着功能基因组研究的需要,新近建立起一项新型高效的基于体内同源重组的遗传工程技术--重组工程技术.重组工程可定义为:基于噬菌体短同源序列重组功能的遗传工程,或者基于同源重组的遗传工程.λ噬菌体Red系统完全不同于传统的依赖RecA的大肠杆菌...
- 概要：
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【中文期刊】 杜庆林 樊祥宇 等 《遗传》 2012年34卷7期 857-862页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 致病性分枝杆菌仍然是人类健康的重要威胁.相对于传统模式原核生物,在分枝杆菌中进行基因敲除一直是一个难题.文章介绍了分枝杆菌中用于基因敲除的转运载体和序列特异性重组系统的研究进展,并进一步介绍了新近发展的分枝杆菌重组工程在基因敲除中的应用.最...
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【中文期刊】 李山虎 施庆国 等 《生物工程学报》 2008年24卷4期 576-580页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了应用Red重组工程技术实现外源基因在大肠杆菌染色体上的表达,寻找染色体上外源蛋白的稳定高效表达位点,使用Red重组工程系统和kan/sacB无痕迹修饰技术,将易于定量分析的荧光素酶报告基因替换DY330染色体lac操纵子中的lacZ基因...
- 概要：
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【中文期刊】 吴洋 李山虎 等 《生物工程学报》 2007年23卷4期 598-601页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组工程是近年来建立的一种基于高效率体内同源重组的新型遗传工程技术,可应用于靶DNA序列的敲入、敲除和基因克隆等.在应用重组工程技术进行基因亚克隆时发现,体外重叠PCR法难以获得高质量的目的DNA打靶片段,严重影响重组效率.为了解决上述问题...
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【中文期刊】 邹少兰 洪解放 等 《生物技术通报》 2007年2期 124-127,150页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组工程(recombineering)是近几年来兴起的一种基于体内同源重组的、新型的遗传工程技术.作为重组工程应用方式之一的空隙修复(gap-repair),是一种捕捉和克隆目的DNA的方法,具有操作简单、步骤少,没有突变、保真度高,不受...
- 概要：
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【中文期刊】 田永强 赵国屏 等 《中国抗生素杂志》 2006年31卷3期 129-134,180页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 基于微生物内源重组系统建立的体内重组工程已成为对生物体内基因功能研究的主要技术,通过基因敲除与嵌入,或大片段DNA的缺失与插入,然后根据生物体表型的变化可以确定该基因或基因簇在体内行使的功能.随着对噬菌体重组系统的认识,发展出了一种新的重组...
- 概要：
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【中文期刊】 李山虎 王健 等 《生物工程学报》 2005年21卷4期 520-523页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据重组工程原理,建立了一种用于构建重组质粒的"neo/E"(抗生素/单酶切位点)选择与反选择新方法.首先采用PCR方法扩增出线性打靶分子:然后进行两步体内同源重组,(1)neo/E基因敲入,重组子呈现neo抗性表型;(2)目的基因替换ne...
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【中文期刊】 于梅 周建光 《生物技术通讯》 2004年15卷6期 617-619页ISTICCA
【摘要】 大肠杆菌的同源重组依靠内源性的RecA蛋白.RecBCD降解双链线性DNA分子,因此必须构建环状质粒打靶载体才能完成体内重组,操作过程繁琐,所需同源臂长.最近建立起的依赖于Rac噬菌体的ET重组系统和基于λ噬菌体的Red重组系统,可有效利用...
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