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【中文期刊】 李欣悦 金月 等 《中国热带医学》 2025年25卷3期 328-332页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建人淋巴细胞激活基因3(lymphocyte activation gene 3,LAG3)慢病毒重组表达载体,并转染小鼠成纤维细胞3T3以获得LAG3优势表达的单克隆细胞株.方法 提取人外周血单核细胞总RNA并逆转录为cDNA,以...
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【中文期刊】 毛灵琪 李存治 等 《生物技术通报》 2016年32卷4期 203-209页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在建立一种适合环己胺降解菌NyZ12基因无痕敲除的可靠方法。通过overlapping PCR技术将目的基因上下游同源臂融合并克隆到自杀载体pEX18km上,将重组质粒转化到大肠杆菌S17 pir中,再通过接合转移到假单胞菌NyZ12菌株...
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【中文期刊】 殷子斐 王丽娜 等 《生物技术通报》 2015年9期 49-59页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体是目前基因治疗研究中常用的、非常有前景的载体之一。欧洲第一个批准上市的基因治疗药物正是基于rAAV。然而,rAAV的转导效率相对有限,导致...
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【中文期刊】 李景传 薛博夫 等 《生物工程学报》 2015年31卷3期 411-420页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为大量制备β-NGF,构建了一种稳定、高效表达重组人神经生长因子(Recombinant human nervegrowth factor,rh-β-NGF)的真核表达载体及含该重组载体的HEK293细胞株.首先,构建重组质粒pCMV-β-...
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【中文期刊】 占申标 唐明青 等 《生物技术通报》 2015年12期 63-69页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组腺相关病毒(rAAV)作为唯一一种通过欧盟FDA认证的基因治疗载体,具有宿主范围广、转染效率高、非致病性、免疫原性低、能够长期表达外源基因的优点。随着以rAAV基因治疗临床试验的深入与扩大,传统rAAV包装系统产能不足的缺点逐渐凸显出来...
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【中文期刊】 张旻 姜绍通 等 《生物工程学报》 2015年31卷8期 1203-1218页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了建立适合米根霉的遗传转化体系,应用重叠延伸PCR的方法构建了以潮霉素B抗性为选择标记的单交换整合型表达载体pBS-hygro-ldhA;分别采用PEG/CaCl2介导的原生质体转化、原生质体电转化及萌发孢子电转化的方法将表达载体pBS-...
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【中文期刊】 王子杰 邓忠磊 等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2015年35卷2期 173-177页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建小鼠B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)基因重组慢病毒载体,探讨BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞增殖及活化的影响.方法:以小鼠脾脏组织总RNA为模板,逆转录为cDNA,通过PCR技术扩增BTLA基因,构建pWPTS-mBTLA慢病...
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【中文期刊】 左颀 赵心清 等 《生物工程学报》 2014年30卷4期 669-673页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 染色体整合表达可获得稳定遗传的基因工程菌,是工业酿酒酵母育种的重要手段.pAUR135整合载体是抗生素标记基因可循环使用的载体,添加特定的同源臂后可构建在酵母染色体上稳定遗传的菌株.目前对酵母菌的分子育种常需要对多个基因进行过表达,利用pA...
【关键词】 同源重组;pAUR135整合载体;工业酿酒酵母;
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【中文期刊】 余希尧 钟泽民 等 《微生物学通报》 2014年41卷5期 849-856页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]构建里氏木霉分泌型表达载体,通过表达绿色荧光蛋白论证载体的可行性并初步观察绿色荧光蛋白在里氏木霉中的分泌过程.[方法]应用PCR及分子克隆技术将里氏木霉(Trichoderma reesei)纤维二糖水解酶(CBHl)的启动子及CB...
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