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【中文期刊】 李燕婷 范锋锋 等 《中国新药杂志》 2016年25卷22期 2590-2595页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:应用动态浊度法监测重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)制备各阶段料液中的细菌内毒素含量,为其工艺优化和质量控制提供依据.方法:参考应用《中华人民共和国药典》2015年版三部载录的动态浊度法测定细菌内毒素含量,对该方法的专属性、精密度、...
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【中文期刊】 李燕婷 范锋锋 等 《中国新药杂志》 2015年24卷20期 2346-2351页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探索建立免疫单扩散法测定不同料液中重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,rEPA)蛋白含量新方法.方法:对缓冲液系统、最佳抗体浓度和最佳观测时间等关键因素...
【关键词】 免疫单扩散法；方法验证；重组铜绿假单胞菌外毒素A；
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【中文期刊】 佟伟 吴囡 等 《现代预防医学》 2008年35卷12期 2317-2318,2320页ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]对铜绿假单胞菌外毒素A (PEA)全基因进行基因克隆,构建原核表达质粒并加以鉴定.[方法]从铜绿假单胞菌中提取基因组DNA,设计PCR引物扩增出带信号肽的PEA目的基因,经Hind Ⅲ和EcoRⅠ消化后,与PET-32a载体进行连接...
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【中文期刊】 佟伟 李宏伟 等 《中国人兽共患病学报》 2008年24卷5期 455-457页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 实现铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)全基因的原核载体构建及融合性表达.方法 用基因重组技术构建PET-32a-PEA重组体,并在大肠杆菌BL21中进行表达.结果 酶切鉴定及测序结果表明PET32a载体上成功地插入了PEA 全基因.用IP...
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【中文期刊】 胡晓梅 饶贤才 等 《解放军医学杂志》 2004年29卷2期 156-158页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的实现铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)全基因的可溶性表达.方法用基因重组技术构建pMAL-PEA原核分泌型表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,然后利用直链淀粉树脂对表达蛋白进行亲和层析纯化.结果酶切鉴定及测序结果表明pMAL-P2X载...
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【中文期刊】 王晓庆 贺燕 等 《食品安全导刊》 2024年15期 111-114页
【摘要】 基于铜绿假单胞菌中高度保守的外毒素A基因设计特异性引物,建立并优化重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)条件,并评价该方法的灵敏度和抗干扰能力.结果显示,RPA反应体系能够在 4...
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【中文期刊】 毛春燕 安钢力 等 《中国免疫学杂志》 2017年33卷4期 558-562,573页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建基于EGFR纳米抗体的免疫毒素BI7D12-PE38KDEL,并检测其对EGFR肿瘤细胞的细胞毒作用.方法:采用分子克隆技术,将靶向EGFR的纳米抗体7D12以二价的形式,通过柔性连接肽(G4S)4与铜绿假单胞菌外毒素的截断形式P...
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【中文期刊】 姜明子 冯旰珠 《医学研究生学报》 2014年7期 694-697页ISTICPKU
【摘要】 目的：外毒素A（ toxA基因编码）是铜绿假单胞菌毒力最强的因子之一，PcrV（ pcrV基因编码）是铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统的关键调控因子之一。文中旨在构建重组toxA和pcrV基因的铜绿假单胞菌核酸疫苗，并在HEK-293细胞中表达目的...
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【中文期刊】 胡晓梅 黄建军 等 《医学研究生学报》 2004年17卷5期 388-390页ISTICPKU
【摘要】 目的: 优化重组铜绿假单胞菌外毒素A(PEA)基因工程菌的发酵条件,实现PEA的高效表达. 方法:构建PEA的原核分泌型基因工程菌,利用摇瓶发酵研究PEA工程菌的最优表达条件,并放大至3.75 L发酵罐水平.结果:摇瓶发酵的最优培养条件为温...
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【中文期刊】 胡晓梅 胡福泉 等 《中国人兽共患病杂志》 2003年19卷4期 93-95页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的从绿脓杆菌中提取染色体DNA,PCR扩增及克隆外毒素A全长基因,为实现外毒素A的高效表达奠定基础.方法从绿脓杆菌培养物中提取染色体DNA,PCR扩增外毒素A全长基因,A-T克隆入本室自行构建的pSK-T载体中,对重组质粒进行酶切与测序鉴...
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