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【中文期刊】 张继红 张靖 等 《生物技术》 2010年20卷5期 40-42页 ISTICCA
【摘要】 目的:重叠延伸PCR(OE-PCR)方法合成人血管内皮生长因子(VEGF)基因.方法:根据Genbank中人VEGF基因的编码序列合成15个寡核苷酸片段,相邻引物间均有19个碱基互补,经过7轮PCR循环扩增出人VEGF基因,并将其克隆至pM...
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【中文期刊】 周仁芳 曾爱平 《中国实验诊断学》 2008年12卷7期 860-863页 ISTIC
【摘要】 目的 了解浙江沿海地区汉族人群中CYP2D6基因拷贝数多态性分布.方法 使用改良的长模板PCR技术对浙江沿海地区汉族人群中的285例健康人群,进行CYP2D6基因拷贝数多态性进行检测.结果 CYP2D6*5缺失型和CYP2D6*×N重复基因...
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【中文期刊】 《天津医科大学学报》 2000年6卷3期 271-273页 ISTIC
【摘要】 目的:以简便、特异的方法获取目的基因片段用于体外构建重组体。方法:以引物互为模板的聚合酶链反应合成目的基因片段。该目的基因片段经限制性内切核酸酶水解后被连接至克隆载体,克隆后经筛选并电泳鉴定。结果:以聚合酶链反应合成了目的基因片段,并获得相...
【关键词】 人血管生长因子; 聚合酶链反应(PCR); 引物互为模板;
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【中文期刊】 薛朝阳 周雪平 等 《生物化学与生物物理学报》 2000年32卷3期 270-274页 SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 利用RT-PCR技术获得了含烟草花叶病毒蚕豆分离物(TMV-B)的全长基因组cDNA, 并克隆至pT7Blue载体中. 以获得的全长cDNA及其PCR产物为模板分别进行体外转录, 接种试验发现转录产物均具有侵染活性. 比较两种方法发现以PC...
【关键词】 烟草花叶病毒; 侵染性全长cDNA克隆; 长模板PCR;
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【中文期刊】 白向阳 吕安国 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷2期 181-184页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的PCR产物克隆于T载体上,经转化JM109感受态菌株后,随机挑取8个白斑菌落,混合后制成混合模板.采用3条引物,做两轮重叠PCR反应,获得了...
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【中文期刊】 唐晔盛 李英 等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷2期 316-318页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 一种利用菌落直接PCR扩增DNA并用于测序的实验方法.通过对引物的设计和菌液浓度控制,使PCR反应后的内容物对测序干扰减到最小.与传统的测序过程比较,它省去了抽提模板DNA一步,节省了大量时间和实验成本.另外此方法可对BAC亚克隆库构建时由...
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【中文期刊】 鞠斌 王卫 等 《中国比较医学杂志》 2012年22卷10期 37-42页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 建立RT-SHIV病毒全长rt基因单拷贝PCR扩增方法,用于HIV-1 rt基因体内遗传与变异研究.方法 Oligo软件设计RT-SHIV rt基因特异性扩增引物,梯度稀释方法进行特异性和灵敏度筛选,进而优化退火温度和PCR反应最佳循...
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【中文期刊】 赵泽赟 刘淑英 等 《中国人兽共患病学报》 2011年27卷6期 547-551页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 为能够更加准确、敏感的检测绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis SPA).方法 本试验通过外源性绵羊肺腺瘤病毒的囊膜基因env的TM区和长末端重复序列LTR的U3区分别设计特异性的内外侧引物,运用巢式...
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【中文期刊】 刘娜娜 季孔庶 《基因组学与应用生物学》 2009年28卷5期 975-980页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究利用改良CTAB法从珍珠黄杨叶片中提取基因组DNA作为模板,在TaqDNA聚合酶量不变的基础上,利用正交设计L_9(3~4)对4个因素(模板DNA、Mg~(2+)、dNTP和引物)在3个水平上对珍珠黄杨ITS-PCR反应体系进行优化....
【关键词】 珍珠黄杨; CTAB; ITS-PCR反应体系;
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【中文期刊】 郑梅竹 时东方 等 《基因组学与应用生物学》 2009年28卷5期 865-868页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究采用扩增条件优化的PCR扩增技术,以MDCC-MSBl细胞基因组DNA为模板扩增出鸡端粒酶RNA(chicken telomerase RNA,chTR)全长基因,克隆到pMD18-T载体中,经酶切鉴定和PCR鉴定后测定序列.序列分析...
【关键词】 鸡端粒酶RNA基因; 基因克隆; Touch-down PCR;
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