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          【中文期刊】 薛朝阳  周雪平  等 《生物化学与生物物理学报》 2000年32卷3期 270-274页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP

          【摘要】 利用RT-PCR技术获得了含烟草花叶病毒蚕豆分离物(TMV-B)的全长基因组cDNA, 并克隆至pT7Blue载体中. 以获得的全长cDNA及其PCR产物为模板分别进行体外转录, 接种试验发现转录产物均具有侵染活性. 比较两种方法发现以PC...

          【关键词】 烟草花叶病毒侵染性全cDNA克隆模板PCR

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          【中文期刊】 黄亚威  杨昂  等 《微生物学报》 2017年57卷8期 1262-1269页ISTICPKUCSCDCABP

          【摘要】 [目的]与设置单一退火温度的常规PCR (S-Tin PCR)不同,本研究探讨双退火温度PCR (D-Tm PCR)由高到低设置2条引物各自退火温度.[方法]以PxF61和VPel为正/反向引物,用Q5 DNA聚合酶扩增4.3 kb的模式D...

          【关键词】 双退火温度PCRDNA

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          【中文期刊】 李春川  潘孝明  等 《生物技术通报》 2016年32卷12期 180-188页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 旨在研究反向重复序列形成的发卡结构对模板扩增的影响。研究 DNA 发卡结构中环部大小、茎部长度、引物相对于茎部位置等对 PCR 扩增效率的影响,探讨如何通过引物设计及改变退火温度等条件来实现发卡结构 DNA 的有效扩增的方法。结果显示,如果...

          【关键词】 发卡结构PCR扩增反向重复序列

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          【中文期刊】 马小松  刘金钊  等 《中国矫形外科杂志》 2011年19卷10期 851-854页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 [目的]构建骨形态发生蛋白BMP2和转化生长因子TGFβ3双基因真核表达载体.[方法]从人胚胎组织提取总RNA,反转录成cDNA,以pGEMT/BMP2和反转录的cDNA为模板,PCR扩增出BMP2和TGFβ3两个基因全长,将两个基因片段分...

          【关键词】 BMP2TGFβ3真核表达载体

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          【中文期刊】 郭艳  兰林  等 《第三军医大学学报》 2011年33卷11期 1144-1147页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的 基于pJFH-1建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方法.方法 以pJFH-1为测试模板,通过优化PCR扩增中各个重要环节,包括引物的选择、甘油和/或DMSO最适浓度的筛选、循环条件的摸索等,建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PC...

          【关键词】 PCRpJFH-1HCV全基因组

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          【中文期刊】 眭顺照  马婧  等 《中国中药杂志》 2011年36卷6期 751-754页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 目的:建立金荞麦愈伤组织总RNA提取方法.方法:采用CTAB法结合LiCl沉淀的改良方法提取RNA,紫外分光光度检测、0.8%非变性琼脂糖凝胶电泳检测,RNA的反转录等评价RNA质量.结果:提取的总RNA 28S和18S条带清晰,且A260...

          【关键词】 金荞麦愈伤组织总RNA提取

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          【中文期刊】 杨霞  刘芳  等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷3期 69-73页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 基因(组)操作者常会遇到高GC序列难于扩增的问题.全球范围内也还没有很成熟的通用方法来解决这个问题.经过系统的摸索,发现选用有机试剂乙二醇和1,2-丙二醇能得到比较满意的特异的PCR产物.104段随机选取的GC含量在60%~80%之间的人类...

          【关键词】 高GC序列乙二醇1,2-丙二醇

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          【中文期刊】 庞虹  《昆虫天敌》 2001年23卷2期 55-59页ISTICPKUCSCD

          【摘要】 本文对酒精浸泡的六斑月瓢虫Menochilus sexmaculata(Fabricius)标本进行基因组DNA的提取,用线粒体16 SrDNA引物扩增出长度约为500bp的PCR产物,为进一步开展瓢虫的分子系统学研究打下基础.

          【关键词】 瓢虫科六斑月瓢虫PCR

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          【中文期刊】 刘可可  聂珍媛  等 《现代生物医学进展》 2011年11卷18期 3408-3412页ISTICCA

          【摘要】 目的:研究Acidiphilium cryptum DX1-1 CO2固定相关基因的克隆及在不同营养方式下的差异表达.方法:以Acidiphilium cryptum DX1-1(CCTCC M 208056)的DNA为模板,基于A.cry...

          【关键词】 隐藏性嗜酸菌CO2固定基因RT-qPCR

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          【中文期刊】 钟志成  黎诚耀  等 《热带医学杂志》 2010年10卷3期 253-257页ISTICCA

          【摘要】 目的 通过对重叠延伸PCR技术的改进,建立一种可用于多DNA片段连接的SOE-PCR方法 .方法 扩增获得相互重叠的1.8、1.1、1.3 kb的短片段,以之作为亚片段模板.在SOE-PCR反应体系中加入不同数量用于重叠的亚片段模板及延伸所...

          【关键词】 重叠延伸PCR(SOE-PCR)突变多片段连接

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