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【中文期刊】 蒲远波 郭翠 等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 72-79页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 扩增基因的侧翼序列在分子生物学研究中具有重要作用。到目前为止,克隆基因侧翼序列的方法主要可以分为3类:反向 PCR、外源接头介导 PCR、半随机引物 PCR。对这些技术的原理以及近期的应用情况进行了较为系统的综述,旨在为研究者选择更可靠、更...
【关键词】 侧翼序列;反向 PCR;外源接头介导 PCR;
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【中文期刊】 王未未 张永昌 等 《微生物学通报》 2014年41卷4期 719-724页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 主要介绍一种通过原位易错PCR构建随机突变文库的新技术.本实验室最近发表的一项国际专利中,利用来源于海栖热孢菌的极耐热性DNA连接酶,在传统PCR循环中加入一个连接步骤,即变性一退火一延伸一连接的四步循环法PCR,从而实现环状质粒的PCR指...
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【中文期刊】 秦秀林 钱江潮 等 《生物技术通报》 2014年6期 211-217页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 高效的随机突变策略对于构建含有丰富突变体的启动子文库至关重要。为了建立一个突变率适中并能获得较多有益突变子的易错PCR(error-prone PCR,EP-PCR)条件,实现毕赤酵母GAP启动子的高效突变,对EP-PCR反应条件进行了优化...
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【中文期刊】 韩文 罗玉子 等 《微生物学报》 2013年53卷2期 197-203页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 极其多样的病毒广泛存在于我们周围的环境和动物体内,其中很多病毒是人类所未知的,而发现未知病毒常常受制于病毒常规检测技术的局限性.[目的]构建未知病毒检测技术平台.[方法]应用病毒宏基因组学的理念,结合新型分子诊断技术,首先利用过滤和核酸酶处...
- 概要:
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【中文期刊】 刘洋 余洋 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2013年29卷10期 1064-1067页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 以突变TomlinsonⅠ库中筛选的抗细胞黏附分子L1的胞外区单链抗体为例,对定点突变和随机突变两种构建噬菌体抗体次级库的方法进行比较.方法 设计定点突变和随机PCR引物在基因水平经PCR、酶切、连接将已有噬菌粒引入突变后转染大肠杆菌...
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【中文期刊】 刘炯 王忠灿 等 《中国微生态学杂志》 2012年24卷3期 197-203页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨随机引物PCR( Arbitrary primer PCR,AP-PCR)结合克隆测序及生物信息学分析等方法在研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)菌株地域起源特征中的价值和意义.方法 针对临床...
- 概要:
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【中文期刊】 王霄 廉萍 等 《中国热带医学》 2011年11卷7期 854-855页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 对某无菌实验室进行消毒效果检测,并进行细菌种属鉴定.方法 按照<消毒与实验技术规范>和<消毒技术规范>进行消毒,随机引物PCR法进行阳性菌落种属鉴定.结果 物体表面(90.90%)及压力蒸汽灭菌(100.00%)基本达到国家自然菌杀灭...
- 概要:
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【中文期刊】 宋芬芬 江贤章 等 《微生物学通报》 2011年38卷5期 694-701页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 毛霉Mucor sp.EIM-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶.为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mca6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵...
- 概要:
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【中文期刊】 吕雪莲 张晓利 等 《菌物学报》 2010年29卷1期 91-95页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 分别采用rRNA基因内转录间隔区(ITS)和基因间隔区(IGS1)测序,ITS和IGS1区PCR限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和基因组DNA的随机扩增多态性DNA(RAPD)等方法,对三株因肯毛孢子菌Trichosporon ...
【关键词】 rRNA基因测序;PCR限制性片段长度多态性分析;随机扩增多态性DNA;
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【中文期刊】 郭芮伶 吴国明 等 《第三军医大学学报》 2010年32卷23期 2533-2535页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系.方法 分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应...
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