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【中文期刊】 张涛 周海胜 等 《生物学杂志》 2024年41卷2期 8-15,56页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据转氨酶家族进化分类和底物特异性,构建一个包含 36 个ω-转氨酶的酶库;将酶库中的基因克隆进大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行异源重组表达,考察酶蛋白表达水平并测定相应的酶活以及对映体选择性.通过筛选,获得最佳的ω-转氨酶为...
【中文期刊】 夏婷 张萌 等 《生物学杂志》 2024年41卷5期 26-33页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 β-葡萄糖苷酶因分离提取困难、酶活性低等因素限制其工业应用.从芒草驯养的牛瘤胃微生物宏基因组中克隆得到一个β-葡萄糖苷酶编码基因Bgls3并进行生物信息学分析,构建pET30a(+)-Bgls3于大肠杆菌BL21(DE3)中成功异源表达,并...
【中文期刊】 翟征远 侯凯旋 等 《食品与生物技术学报》 2024年43卷10期 12-20页
【摘要】 牛乳清蛋白约占牛乳中总蛋白质质量的20%,因其较高的营养价值和多功能性,在食品工业中被广泛应用,市场需求巨大.但国内在牛乳清蛋白生产方面存在原料不足、缺乏高效分离技术等问题.传统生产方式不仅复杂,而且伴随严重的"三废"污染.利用合成生物学技...
【中文期刊】 郝小静 苑明雪 等 《食品研究与开发》 2024年45卷12期 218-224页
【摘要】 葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)作为一种需氧脱氢酶,能够利用分子氧专一性将β-D-葡萄糖氧化生成过氧化氢和葡萄糖酸,基于这一反应机理,葡萄糖氧化酶表现出良好的杀菌和抑菌活性,因此被广泛应用于食品、饲料、临床诊断、生物技...
【中文期刊】 贺晨曦 陈曦 等 《食品研究与开发》 2024年45卷21期 187-194,216页
【摘要】 从链霉菌中克隆一个磷脂酶 D(phospholipase D,PLD)的编码基因 Sp-TLI146,并将其在大肠杆菌 BL21(DE3)中进行异源表达.利用镍离子亲和层析后得到纯酶并对其酶学性质进行研究.酶学性质研究显示,重组PLD的最适...
【中文期刊】 褚佳琪 王雪茗 等 《交通医学》 2024年38卷6期 561-565页
【摘要】 目的:建立反向DNA-pull down方法,验证目的蛋白与靶DNA的结合,为探究疾病发生发展的分子机制提供新的手段.方法:以小鼠骨髓来源巨噬细胞总cDNA为模板,通过PCR扩增获得转录因子PU.1-ETS结构域编码序列,通过酶切连接的方式...
【关键词】 蛋白-DNA结合； 反向DNA-pull down方法； 异源表达；
【中文期刊】 李岩 冯健举 等 《生物资源》 2023年45卷4期 355-364页 ISTICCA
【摘要】 本论文以蜜环菌属(Armillaria mellea)真菌CPCC 400891为研究对象,基因组挖掘分析发现该菌株基因组中含有18个倍半萜合成酶编码基因,但其功能却鲜有报道.采用色氨酸营养缺陷型表达载体pYET,并以酿酒酵母(Saccha...
【中文期刊】 张念 林颖颖 等 《江西师范大学学报（自然科学版）》 2023年47卷3期 237-241页
【摘要】 为探究真核菌株草酸青霉16 的β-葡萄糖苷酶(16BGL)在不同宿主中的异源表达情况,该文通过基因克隆技术,将16BGL基因分别与pPIC9K、pET-28a、pGAPZαA载体进行连接,转化到毕氏酵母GS115 或大肠杆菌Rosetta(...
【中文期刊】 王丽 赵子龙 等 《食品与发酵工业》 2023年49卷16期 41-48页
【摘要】 酶是天然存在的高效催化剂,长期的进化过程产生了诸多的同源酶,同源酶的序列相似高却有不同的功能,而导致功能差异的原因也倍受关注.类胡萝卜素合成过程中,番茄红素 β-环化酶(lycopene β-cyclase,LCYB)和新黄质合酶(neox...
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