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【中文期刊】 张莹 刘旭  等 《西安交通大学学报（医学版）》 2016年37卷6期 776-782页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 在细胞水平及体外验证腺苷酸环化酶相关蛋白1(CAP1)蛋白与PIF1解螺旋酶及其剪接体是否存在相互作用.方法 采用激光共聚焦免疫荧光实验,通过细胞内蛋白共定位确定蛋白质间的相互作用关系;GST Pull-down实验在体外验证CAP1...

【关键词】 腺苷酸环化酶相关蛋白1(CAP1)； PIF1； 激光共聚焦免疫荧光；

【中文期刊】 李珊珊 刘旭  等 《西安交通大学学报（医学版）》 2014年35卷5期 595-598,699页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位.方法 以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF...

【关键词】 解螺旋酶； PIF1； 重组质粒；

【中文期刊】 王攀 王建校  等 《西安交通大学学报（医学版）》 2013年34卷5期 595-598页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 应用酵母双杂交技术研究筛选与人类PIF1解螺旋酶相互作用的蛋白.方法 应用酵母双杂交技术,以人PIF1蛋白PINT功能域(1～180氨基酸)和解螺旋酶模序(167～926氨基酸)为诱饵,与HeLa细胞cDNA文库杂交,筛选能与人PIF...

【关键词】 人PIF1解螺旋酶； PINT功能域； 酵母双杂交；

【中文期刊】 顾永清  《西安交通大学学报（医学版）》 2009年30卷3期 272-275页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,纯化只含有解螺旋酶模序,不含N-末端的PIF1蛋白--PIF1△N,并对其生物化学活性进行检测.方法 以Hela细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1的540～1 923的cDN...

【关键词】 PIF1解螺旋酶； 蛋白纯化； ATP酶；

【中文期刊】 郭海磊 刘娜女  等 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 2017年45卷6期 206-212页

【摘要】 [目的]通过原核表达系统获得嗜热的厌氧棒菌(Anaerobaculumh ydrogeni ormans)DNA解旋酶Pif1(AnaPif1),研究其体外最佳解旋条件,为深入研究嗜热菌Pif1家族解旋酶工作机理提供参考.[方法]构建重组载...

【关键词】 厌氧棒菌； Pig1解旋酶； 蛋白表达纯化；

【中文期刊】 王帅锋 刘娜女  等 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 2016年44卷9期 207-213页

【摘要】 [目的]通过原核表达系统获得热脱硫弧菌(Thermodesulfovibrio yellowstonii H.)Pif1解旋酶(TyPif1),研究TyPif1解旋酶的嗜热特性和解旋机理.[方法]将Typif1解旋酶编码区和SUMO促溶标签...

【关键词】 热脱硫弧菌； Pif1解旋酶； 蛋白表达纯化；

【中文期刊】 顾永清 朴金莲  《石河子大学学报（自然科学版）》 2009年27卷2期 139-143页

【摘要】 解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢,具有重要的生理功能.为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1基因5′端含有1～534核苷酸的cDNA序列-PIFΔC.在PIFΔC...

【关键词】 PIF1解螺旋酶； PIFΔC蛋白质； 蛋白质纯化；

【中文期刊】 顾永清 Kenji Kamiya  《农垦医学》 2008年30卷6期 449-452页

【摘要】 目的:表达纯化人类PIF1解螺旋酶c-末端的338-641氨基酸的多肽PIF338-641,同时用纯化蛋白制备特异抗体.方法:从HeLa细胞的cDNA文库中PCR扩增得到PIF1解螺旋酶c-末端1012-1926的cDNA片段(对应氨基酸3...

【关键词】 PIF1解螺旋酶； 蛋白纯化； 抗体制备；

【中文期刊】 曹汝菲 李泽轩  等 《生物技术通报》 2021年37卷9期 180-190页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 获得可用于X射线衍射的B.f Pif1单晶以用于探究B.f Pif1结构与功能.构建原核表达载体pET15b-SUMO-B.f Pif1,并进行B.f Pif1重组蛋白的诱导表达;经镍柱亲和层析、SUMO酶切、DEAE交换层析与S200凝胶...

【关键词】 Pif1解旋酶； 脆弱拟杆菌； 重组表达纯化；

【中文期刊】 顾永清  《生物工程学报》 2009年25卷2期 268-273页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 Pif1解螺旋酶家族在酵母到人的进化中非常保守,在生物体内具有很多重要的生理作用.为了从生物化学水平研究人类PIF1的功能,从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到人类PIF1全长基因,通过共转化一个携带稀有遗传密码tRNA1的质粒和一个编码...

【关键词】 PIF1解螺旋酶； 蛋白表达和纯化； ATP酶活性；