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【中文期刊】 李岩 李薇 等 《中国老年学杂志》 2013年33卷22期 5614-5616页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 通过慢病毒载体介导的RNA干涉方法抑制胃癌细胞(AGS) Bmi-1基因的表达,观察其对AGS细胞增殖、侵袭能力等生物学活性的影响.方法 用慢病毒载体介导的RNA干涉方法抑制人胃癌细胞AGS中Bmi-1基因的表达,利用MTT法检测其对...
【中文期刊】 《西北植物学报》 2009年29卷10期 1962-1966页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 依据RNA干涉机制,以TMV复制酶基因为靶标基因,针对TMV 5个株系复制酶基因间高度同源序列设计引物,经RT-PCR反应获得靶序列,构建靶序列反向重复结构的RNA干涉双元载体.用根癌农杆菌介导将外源基因转化至烟草品种K326基因组中,培育...
【中文期刊】 吴元明 张晓楠 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2008年24卷2期 115-118页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建用于RNAi的shRNA(small hairpin RNA)表达载体及检测其对低氧诱导因子-1(Hypoxia-inducible Factor-1,HIF1)基因的沉默效果.方法:从人血基因组中PCR扩增出H1基因启动子,克隆...
【中文期刊】 律凤霞 郭兆奎 等 《植物研究》 2008年28卷3期 310-314页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 以TMV复制酶基因作为RNAi的靶向序列,应用RT-PCR法获得目的DNA序列.依据RNAi机制,以酶切后连接的方法将目的DNA序列正向、反向锚定连接到pUCCRNAi载体质粒,构建含目的序列反向重复结构的RNA干涉中间载体;反向重复结构酶...
【中文期刊】 赵行宇 张巍 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2007年23卷10期 967-968,972页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:设计并构建针对人caspase-8基因mRNA的siRNA表达载体,观察其对转染细胞中的caspase-8的抑制作用.方法:化学合成用于产生针对caspase-8的发夹状的RNA的寡核苷酸,将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入经Hi...
【中文期刊】 赵鹏 郭永智 等 《中华神经医学杂志》 2007年6卷3期 265-269页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的小片段RNA(siRNA)表达载体,为研究RNA干涉(RNAi)在哺乳动物细胞内抑制靶基因表达奠定基础.方法 根据siRNA靶点设计的原则运用相关软件设计靶序列并合成其表达框,连接人质粒载体pR...
【中文期刊】 常平安 陈瑞 等 《中华劳动卫生职业病杂志》 2006年24卷1期 27-30页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建人神经病靶标酯酶(NTE)双链RNA的稳定表达载体.方法用Spe Ⅰ和XhoⅠ将pSUPER质粒中的H1 RNA聚合酶Ⅲ启动子及多克隆位点部分切下替换pcDNA3.1(+)载体中的巨嗜细胞病毒(CMV)启动子及其多克隆位点,构建了适...
【中文期刊】 高荣保 胡勇 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2006年26卷7期 593-597页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的应用质粒介导的RNA干扰技术研究siRNA抑制截短HCMV IE2基因的表达的作用.方法以pLL3.7质粒为模板,采用半套式PCR的方法扩增出含U6启动子的siRNA表达片段,连接pMD-T simple vector构建效应质粒表达重...
【中文期刊】 曾志锋 李月琴 等 《中国生物工程杂志》 2005年25卷1期 39-43页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了研究RNA干涉抑制HCMV UL49基因的作用,以pLXSN(U6启动子)为模板通过两步PCR的方法扩增含U6启动子的siRNA表达片段,并通过TA克隆将siRNA表达片段克隆到pMD18-T载体构建成siRNA表达质粒,同时以人巨细胞...
【中文期刊】 李庆霞 刘家云 等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2004年11卷4期 277-280页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建针对人survivin基因的siRNA真核表达载体,检测其对人乳腺癌SKBr-3细胞中survivin基因表达的干涉作用.方法:将合成的寡核苷酸链退火形成双链,连接入经HindⅢ和BglⅡ双酶切后的pSUPER真核表达载体.对重组...