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【中文期刊】 曾利平 闫尧 等 《生物技术通报》 2011年7期 134-138页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过生物信息学方法对Ha105的生物功能进行预测,运用λ噬菌体Red重组系统介导的同源重组,在大肠杆菌BW25113中,用含有350 bp同源臂的氯霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因替换了棉铃虫病毒细菌人工染色体HaBacHZ8上的Ha105基...
【关键词】 棉铃虫核型多角体病毒；Bro基因；基因敲除；
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【中文期刊】 李月玥 刘先凯 等 《军事医学》 2012年36卷5期 345-350页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础.方法 采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本...
【关键词】 志贺菌,弗氏；赖氨酸营养缺陷型突变株；基因缺失；
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【中文期刊】 赵天 朱力 等 《军事医学》 2011年35卷12期 921-927页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 探究gadB基因的潜在功能及其对弗氏志贺菌2a 301株致病能力的影响.方法 利用λ-Red重组系统构建弗氏志贺菌2a 301株的gadB缺失突变株,随后进行基本的表型实验测评,并初步评价其毒力,最后制备突变株和野生株全菌蛋白样品,利...
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【中文期刊】 刘小青 朱力 等 《军事医学科学院院刊》 2010年34卷4期 351-355页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 研究翻译后修饰基因cobB和gtrⅡ对志贺菌致病能力的影响.方法 采用λ-Red重组系统构建福氏2a志贺菌2457T的cobB,gtrⅡ缺失突变株,进行初步的毒力评价,随后制备野生株,cobB,gtrⅡ缺失突变株的全菌蛋白样品,并进行...
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【中文期刊】 王刚 宋兰 等 《生物技术通讯》 2010年21卷2期 175-178页ISTICCA
【摘要】 目的:利用Red系统构建肠出血性大肠杆菌O157:H7的sRNA基因E40缺失突变株.方法:选取本实验室预测并经过实验验证的sRNA基因,根据NCBI上相应的序列,设计2对引物分别扩增该sRNA基因的上下游分别长464和455 bp的同源臂...
【关键词】 肠出血性大肠杆菌O157；H7；sRNA；
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【中文期刊】 郭铃 蒋珂 等 《工业微生物》 2010年40卷3期 39-43页ISTICCA
【摘要】 利用Red重组系统构建了大肠杆菌JM109甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)缺失的双突变菌株JM109B,然后将表达酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因(GPD1)和 3-磷酸甘油酯酶基因(HOR2)的质粒pSE-gpd1-ho...
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【中文期刊】 马延 高原 等 《军事医学科学院院刊》 2009年33卷4期 314-317,355页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:构建EHEC O157:H7 EDL933w z3672基因缺失突变体.方法:根据已知的O157:H7 EDL933基因组全序列,采用pKOBEG介导的Red重组系统,筛选卡那霉素抗性基因替换z3672基因的阳性克隆,然后FLP位点特...
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【中文期刊】 姜娜 王芃 等 《生物技术通讯》 2009年20卷2期 173-176页ISTICCA
【摘要】 目的:利用λRed重组系统敲除伤寒沙门氏菌的rfaH基因.方法:以伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi Ty2,S.ty2)基因组为模板扩增得到的同源臂,与两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段共同构建同源重组载体;以重组载体为...
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【中文期刊】 张穗生 郭媛 等 《广西科学》 2010年17卷2期 160-163页
【摘要】 对Red重组系统介导下大肠杆菌进行遗传改造的转化条件、诱导条件、复苏条件三方面实验参数进行优化研究.结果表明:电转化加入的DNA为20ng,Red重组系统感受态细胞培养浓度为OD600=0.60,所需的电击感受态细胞数为3×108;对大肠杆...
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【中文期刊】 尹国华 刘楠 等 《山东农业大学学报（自然科学版）》 2009年40卷3期 317-324页
【摘要】 大肠杆菌的rnc基因编码产物为RNaseIII酶,RNaseIII酶能降解细菌中绝大多数dsRNA.利用来源于λ噬菌体的Red重组系统和重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,SOE...
【关键词】 Red重组系统；重叠延伸PCR；RNaseIII 缺失菌株；
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