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【中文期刊】 杨公进 马中瑞 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷10期 83-87页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用λ噬菌体Red重组系统敲除大肠杆菌O157∶H7的waaL基因.方法:以pKD4为模板扩增出与waaL基因上下游同源的、含有卡那霉素抗性基因的PCR产物.然后电击转化到大肠杆菌O157∶H7中,利用Red重组系统,通过卡那霉素抗性...
- 概要：
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【中文期刊】 路娟娥 张彪 等 《微生物学报》 2021年61卷8期 2545-2559页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 由食源性致病菌引发的食品安全问题是威胁人类健康的重要因素.因此,研究食源性致病菌的感染机理对于控制病原菌危害具有重要意义.[目的]以常见的食源性致病菌——鼠伤寒沙门氏菌为研究对象,以其发挥重要致病性的转录调控因子SlyA为靶标,比较胞嘧啶单...
【关键词】 鼠伤寒沙门氏菌；SlyA；胞嘧啶单碱基编辑系统；
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【中文期刊】 左玲莉 周丽婷 等 《生物技术通报》 2021年37卷2期 253-260页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌.以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打...
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【中文期刊】 王志林 董震 等 《微生物学报》 2020年60卷8期 1683-1695页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 Ⅵ型分泌系统(T6SS)是大多数革兰氏阴性细菌中都存在的一种重要的分泌系统,能介导细菌与细菌之间以及细菌和宿主细胞之间的相互作用,溶血素共调节蛋白(Hcp)和缬氨酸甘氨酸重复蛋白G(VgrG)是组成T6SS穿刺装置的重要组分.但鼠伤寒沙门氏...
【关键词】 鼠伤寒沙门氏菌；Ⅵ型分泌系统(T6SS)；溶血素共调节蛋白(Hcp)；
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【中文期刊】 李玉娟 陈如意 等 《生物工程学报》 2019年35卷9期 1761-1770页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 基因工程中,无痕修饰是一种很受欢迎的基因组操作技术.反选择系统的严谨性决定了无痕修饰的效率.近期有文献报道了一种新型的反选择系统kil,该系统与质粒pSim6联用后反选择严谨性较pKD46质粒更高,预示着kil与pSim6质粒联用可以更高效...
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【中文期刊】 王萍 董俊芳 等 《微生物学通报》 2018年11期 2529-2536页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [背景]沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌,可引起广泛的胃肠炎以及伤寒、副伤寒,其致病机制一直未被阐明.基因敲除技术在研究沙门氏菌致病性方面发挥了重要作用,然而目前的敲除技术仍存在费时、成功率低的问题.研究发现鼠伤寒沙门氏菌含有Ⅵ型分泌系统...
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【中文期刊】 王仁霞 刘荣娇 等 《微生物学报》 2017年57卷7期 1126-1137页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]利用Red同源重组系统,通过二步PCR法建立一种适合鼠疫耶尔森菌sRNA和大片段染色体基因敲除的方法.[方法]第一步PCR先扩增出目的基因的上、下游同源臂(600-1000 bp)及卡那抗性盒,再以上、下游同源臂及卡那抗性盒等摩尔混...
- 概要：
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【中文期刊】 李晔 张西轩 等 《生物技术通报》 2014年9期 171-177页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用λRed重组系统敲除鼠伤寒沙门氏菌LT2的(Salmonella enterica serovar typhimurium LT2,S.typhimurium LT2)sopB基因.以pKD4质粒为模板,扩增得到中间带有卡那霉素抗性基因...
【关键词】 鼠伤寒沙门氏菌LT2 λRed；重组系统；sopB；
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【中文期刊】 肖梦榕 张梁 等 《生物工程学报》 2014年30卷10期 1561-1572页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用Red重组系统对野生大肠杆菌Escherichia coli磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(Phosphoenolpyruvate:carbohydrate phosphotransferase system,PTS)进行修饰改造,...
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【中文期刊】 葛高顺 张立超 等 《中国生物工程杂志》 2014年34卷6期 68-74页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:优化大肠杆菌基因组基因无痕敲除的方法,提高无痕敲除的效率.方法:以无痕敲除大肠杆菌nanKETA基因簇为模型,利用Red同源重组系统和核酸内切酶I-SceI的筛选作用,通过两步连续同源重组无痕敲除大肠杆菌CLM37基因组中的nanKE...
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