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          【中文期刊】 左玲莉  周丽婷  等 《生物技术通报》 2021年37卷2期 253-260页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌.以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打...

          【关键词】 鼠伤寒沙门菌spvBC基因λRed重组系统

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          【中文期刊】 肖梦榕  张梁  等 《生物工程学报》 2014年30卷10期 1561-1572页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 利用Red重组系统对野生大肠杆菌Escherichia coli磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(Phosphoenolpyruvate:carbohydrate phosphotransferase system,PTS)进行修饰改造,...

          【关键词】 大肠杆菌运动发酵单胞菌PTS系统

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          【中文期刊】 李明明  陈献忠  等 《生物工程学报》 2013年29卷1期 56-67页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 利用代谢工程手段理性改造野生大肠杆菌的莽草酸(Shikimic acid,SA)合成途径及相关代谢节点,以构建高产莽草酸的工程菌株.根据细胞代谢网络分析,利用Red-Xer重组系统连续删除了野生型大肠杆菌CICIMB0013的莽草酸激酶基因...

          【关键词】 大肠杆菌Red-Xer重组系统基因删除

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          【中文期刊】 原志伟  朱晓芳  等 《微生物学通报》 2010年37卷1期 48-54页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 基于大肠杆菌(E.coli)染色体上asd基因的已知序列,利用λ噬菌体的Red同源重组系统一步法构建E.coli DH5α的asd基因缺失突变株DH5α △asd::cat,在二次重组中利用携带能够表达FLP位点特异性重组酶的质粒pCP20...

          【关键词】 大肠杆菌DH5α受体菌Red重组系统

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          【中文期刊】 于慧敏  马玉超  《生物工程学报》 2010年26卷9期 1199-1208页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 基因敲除技术是一项重要的分子生物学技术,在工业微生物代谢工程中具有广泛应用.以下从基因敲除技术 的遗传重组原理出发,总结了基因敲除策略的类型、特征和应用,重点介绍了采用线性双链DNA 的λ Red 同源重组系 统、使用环状质粒载体介导的单交...

          【关键词】 基因敲除λRed重组系统单交换和双交换

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          【中文期刊】 周军智  邹永康  等 《微生物学通报》 2010年37卷8期 1146-1152页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 敲除大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统(简称PTS系统)ptsHIcrr操纵子,考察敲除菌株生长特性并将其与ptsG敲除菌进行比较.利用I-Sce Ⅰ特异性切割和Red同源重组方法成功构建了大肠杆菌DH5αΔXptsHIcrr敲除菌...

          【关键词】 Red同源重组PTS系统ptsHIcrr操纵子

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          【中文期刊】 周丽  田康明  等 《生物工程学报》 2011年27卷1期 31-40页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 菌株 CICIM B0013-030(B0013,ack-pta,pps,pflB)可积累D-乳酸作为主要发酵产物,然而副产物琥珀酸和乙酸的含量分别高达乳酸的11.9%和7.1%.为构建副产物含量低的产D-乳酸重组大肠杆菌菌株,本研究删除了...

          【关键词】 D-乳酸大肠杆菌琥珀酸

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          【中文期刊】 王芳  赵江丽  等 《微生物学通报》 2010年37卷5期 174-720页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 利用λ-Red重组系统对福氏2a志贺氏菌301株ipaH4.5基因进行缺失突变,构建了福氏2a志贺氏菌301株ipaH4.5基因缺失突变株△ipaH4.5,利用低拷贝质粒构建ipaH4.5缺失突变株的回复突变株△ipaH4.5HF.PCR方...

          【关键词】 福氏志贺氏菌ipaH4.5基因缺失

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          【中文期刊】 周丽  牛丹丹  等 《微生物学通报》 2010年37卷6期 923-928页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 快速、高效删除大肠杆菌染色体DNA的目的基因是大肠杆菌代谢工程研究的前提和基础.利用Red重组系统结合Xer重组系统删除了野生型大肠杆菌CICIMB0013的ackA-pta基因和pps基因.实验证明了可重复应用dif位点实现大肠杆菌染色体...

          【关键词】 Xer重组系统dif位点基因删除

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