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【中文期刊】 王永飞 邓博文 等 《中国畜牧兽医》 2024年51卷2期 689-699页
【摘要】 [目的]克隆绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)EF-Tu基因,原核表达获得EF-Tu蛋白,制备抗EF-Tu蛋白的兔源多克隆抗体,为研究肺炎支原体EF-Tu蛋白的结构和功能奠定基础.[方法]采用重叠延伸P...
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【中文期刊】 戴晓燕 于静娟 等 《植物学报》 2004年46卷4期 497-504页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 通过差异筛选法并结合冷噬菌斑筛选,从玉米(Zea mays L.)成熟花粉cDNA文库中克隆到一个玉米花粉特异表达的cDNA片段ZM401(663bp).Northern杂交表明ZM401是一个玉米花粉特异表达的基因.本文采用5'RACE,...
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【中文期刊】 郭敏 雷清 等 《中国新药杂志》 2015年24卷3期 271-275,302页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:将胞内表达载体pAO815改建成分泌型表达载体,并体外构建戊型肝炎病毒ORF2128-660多拷贝重组表达质粒,进一步比较不同转化子在毕赤酵母中的表达水平,以得到高表达重组菌株.方法:利用重叠PCR技术将α-factor信号肽基因与目...
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【中文期刊】 罗文华 郭勇 等 《应用与环境生物学报》 2007年13卷4期 565-569页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 一个来源于豆豉产生菌DC12的新的纤溶酶基因序列被克隆测序.为了实现在枯草杆菌中高水平表达豆豉纤溶酶,将来源于枯草杆菌168的重叠启动子P43序列以及转录终止信号序列通过重叠延伸融合,将融合序列克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pBE3中,构...
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【中文期刊】 董晶莱 张金三 等 《温州医科大学学报》 2018年48卷4期 241-244,250页ISTICCA
【摘要】 目的:构建人Yes相关蛋白1(YAP1)基因亚型1δ、2δ的真核表达载体并进行瞬时表达鉴定,为研究YAP1亚型间的区别及其在肿瘤中的作用打下基础.方法:在已有pCI2-Flag-YAP1-2γ质粒的基础上,利用重叠PCR增加碱基的方法得到Y...
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【中文期刊】 李涛 程秀丽 等 《中国应用生理学杂志》 2016年32卷3期 279-282页MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的:采用重叠PCR法构建表达质粒,为下一步研究通道功能奠定基础.方法:在已有编码大电导钙激活钾通道(BKCa)通道α亚单位的表达质粒pcDNA3.1-hSlo的基础上,采用重叠PCR法构建Flag和GFP双标签标记的表达质粒pcDNA3....
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【中文期刊】 张梦雄 杨志新 等 《生物技术通讯》 2016年27卷2期 158-162页ISTICCA
【摘要】 目的:建立不通过克隆步骤高通量表达来源于人单个B细胞的抗体轻、重链基因的方法.方法和结果:PCR扩增3个末端重叠的DNA片段,即(①CMV启动子和编码抗体引导区序列的片段;②抗体IgG1重链恒定区序列和牛生长激素(BGH)poly(A)信号...
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【中文期刊】 黄文俊 李涛 等 《泸州医学院学报》 2016年39卷6期 527-530页
【摘要】 目的：：采用Overlapping PCR（重叠PCR）法进行人源SK2通道Flag和GFP融合表达质粒的构建，为下一步胞外运用Flag抗体进行SK2通道的转运调控研究奠定基础。方法：在既往克隆的人SK2通道基因的表达质粒pIRES-SK2...
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【中文期刊】 刘健 赵霏霏 等 《四川大学学报（自然科学版）》 2015年52卷5期 1151-1156页
【摘要】 本文介绍了一种构建辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)侵染性克隆的简易方法.基于辣椒脉斑驳病毒的全长确定序列,根据基因内部的单一限制性酶切位点,设计引物,将ChiVMV分成KL1,KL2,KL...
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【中文期刊】 石琳 蔺帅 等 《中国畜牧兽医》 2014年41卷1期 43-46页
【摘要】 本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体(pGHS-R)真核表达系统,并瞬时转染人源胚胎肾细胞(HEK293T)观察其表达情况.以猪基因组为模板,通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应(SOE-PCR)克隆出pGHS-R的编码区序列,插入真核表达载体p...
【关键词】 生长激素促分泌素受体；真核表达；剪接重叠延伸聚合酶链式反应；
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