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【中文期刊】 赵秀芹 夏强  等 《中国人兽共患病学报》 2012年28卷12期 1167-1172页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 利用pJV53质粒编码的分枝杆菌重组工程系统将串取亲和纯化(TAP)标签敲入耻垢分枝杆菌基因组.方法 从质粒pBS1479中扩增出tap片段,从质粒pSMT3中扩增hyg片段,从耻垢分枝杆菌基因组中分别扩增出aasf基因及其5'端非编...

【关键词】 重组工程系统； 串联亲和纯化标签； 敲入片段；

【中文期刊】 李山虎 施庆国  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2008年28卷7期 656-660页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 目的 将外源蛋白或抗原稳定表达展示于大肠杆菌的外膜上.方法 应用大肠杆菌DY330介导的重组工程系统和kan/sacB无痕迹修饰技术,将长度为1653 bp的荧光素酶报告基因(luc)敲入DY330染色体与外膜蛋白基因lpp、ompA融合....

【关键词】 重组工程； 同源重组； 荧光素酶报告基因；

【中文期刊】 卢智勇 杨卓顺  等 《生物技术通讯》 2017年28卷4期 415-421页 ISTICCA

【摘要】 目的:目前应用TALENs或CRISPR-Cas基因编辑技术修饰CCR5基因以获得抗HIV功能的研究策略基本是破坏CCR5基因而不是制造CCR5Δ32这样天然存在的抗HIV基因型.为此,我们尝试通过细菌内同源重组技术构建一个新颖的CCR5Δ...

【关键词】 细菌人工染色体； CCR5； 同源重组；

【中文期刊】 邓蓉康 杜晓霞  等 《华西医学》 2008年23卷3期 433-435页 ISTICCA

【摘要】 目的:利用同源重组的方法, 将arc BAC(bacteria artificial chromosome)启动子区域的SRE(serum response eleme nt)改造成Gal4结合序列,以此通过Gal4/UAS系统增强arc基...

【关键词】 recombineering； galK正负筛选； 细菌人工染色体；

【中文期刊】 杜胜阳 王斌斌  等 《食品与发酵工业》 2016年42卷1期 244-251页

【摘要】 乳酸菌是革兰氏阳性菌,广泛用于食品、医药、轻工业及饲料工业等行业.对乳酸菌进行遗传操作是调节、优化其代谢途径的基础.通过基因敲除技术改造乳酸菌基因组,可以判断基因组中未知基因所编码产物的功能,有目的、有选择地使乳酸菌生产有益的异源基因产物....

【关键词】 基因敲除； 乳酸菌； 同源重组；

【中文期刊】 严振亚 柴美霞  等 《南京师大学报（自然科学版）》 2016年39卷2期 66-72页

【摘要】 毒性基因ccdB是最为常用的一种负筛选标记,ccdB基因和R6K复制子一起组成了高效的基因克隆和基因组修饰的遗传操作元件.为获得高转化效率的容纳ccdB基因的菌株,本研究采用重组工程手段,以经优化去除了错配修复的寡核苷酸与pUC骨架、含有c...

【关键词】 ccdB； R6K； 寡核苷酸；

【中文期刊】 张飞飞 石牡丹  等 《安徽农业科学》 2015年20期 29-31,72页

【摘要】 [目的]提高最常用的异源蛋白表达宿主菌E.coli BL21(DE3)的转化效率.[方法]利用基于质粒的重组工程系统和双链断裂修复功能.[结果]敲除了编码降解外源DNA的Ⅰ型限制性内切酶的ksdR基因,获得了高转化效率以及其他功能与BI21...

【关键词】 重组工程； 基因敲除； 双链断裂修复；

【中文期刊】 李玲 凌文  等 《南京师大学报（自然科学版）》 2014年3期 95-99,105页

【摘要】 TEV蛋白酶由于其高酶切活性、酶切位点的专一性和酶切条件的宽容性而在蛋白分离和蛋白质组学研究等领域有着广泛的应用.目前获得TEV蛋白酶的方法是将克隆在质粒上的TEV基因在大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中实现过表达.但本方法有一定缺点,如...

【关键词】 基于基因组； 重组工程； TEV；

【中文期刊】 刘婷婷 刘嘉琪  等 《微生物学通报》 2024年51卷12期 4854-4868页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 反转录子(retron)主要是由非编码RNA和逆转录酶所组成的参与抗噬菌体防御系统的细菌遗传元件.基于retron能产生多拷贝单链DNA的特性,将其与同源重组蛋白或CRISPR/Cas蛋白相结合已经在细菌和酵母中实现高效精准的基因编辑,而不...

【关键词】 反转录子； 逆转录元件； 微生物基因编辑；

【中文期刊】 《遗传学报》 2018年45卷6期 281-297页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

【摘要】 Mycobacterium tuberculosis,a Gram-positive bacterium of great clinical relevance,is a lethal pathogen owing to its compl...

【关键词】 Mycobacterium tuberculosis； Molecular genetic tools； Gram-positive；